Tartalomra ugrás
GIMEN sejtek
Szövet
Agy
Betegség
Neuroblasztóma
Áttétes hely
Csontvelő
Szinonimák
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumentumok

GIMEN sejtek

Cell line · Termékszám 300179

A GIMEN sejtvonal egy IV. stádiumú neuroblastómával diagnosztizált kisgyermek csontvelő-áttétéből származik. Ezeket a sejteket N-típusúként osztályozzák...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A GIMEN sejtvonal egy IV. stádiumú neuroblasztómával diagnosztizált kisgyermek csontvelő-metasztázisából származik. Ezek a sejtek N-típusúnak minősülnek, ami jellemzően neuroblastikus fenotípust jelez, amelyet nagy sejtsűrűség, neuronális tulajdonságok és a kultúrában történő kiterjedt neurit kinövés képessége jellemez. A GIMEN sejtvonal létrehozása értékes modellt biztosít a neuroblasztóma agresszív formáinak hátterében álló molekuláris és sejtszintű mechanizmusok tanulmányozásához, különösen azokhoz, amelyek metasztatikus terjedéssel járnak.

Funkcionálisan a GIMEN sejtek figyelemre méltó kölcsönhatásokat mutatnak különböző citokinekkel és növekedési faktorokkal. Különösen az interferon-gamma (IFN-gamma) gátolja növekedésüket, amely citokin bizonyos rákos sejtekre gyakorolt antiproliferatív hatásáról ismert. Továbbá a fibroblaszt növekedési faktor-2 (FGF-2) antimitogén hatást fejt ki ezekre a sejtekre, ami az IFN-gamma hozzáadásával visszafordítható. Ez a visszafordulás arra utal, hogy a sejtproliferáció modulálásában e faktorok között összetett kölcsönhatás áll fenn. Ezenkívül az interleukin-1 béta (IL-1 béta) fokozza az FGF-2 antimitogén hatását, ami a neuroblastóma mikrokörnyezetében a tumor növekedési dinamikájának szabályozásában játszott lehetséges szerepére utal. Ezek a kölcsönhatások kiemelik a GIMEN sejtvonal hasznosságát a citokinek és a növekedési faktorok neuroblastoma progressziójára és a terápiára adott válaszra gyakorolt hatásának feltárásában.

Szövet
Agy
Betegség
Neuroblasztóma
Áttétes hely
Csontvelő
Szinonimák
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kettőzési idő
25 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
GIMEN (Cytion katalógusszám: 300179)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
3,5 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi