Премини към съдържанието
Клетки GIMEN
Тъкан
Мозък
Заболяване
Невробластом
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Документи

Клетки GIMEN

Cell line · Номер на продукта 300179

Клетъчната линия GIMEN е получена от метастаза в костния мозък на малко дете, при което е диагностициран невробластома в IV стадий. Тези клетки се класифицират като тип N...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия GIMEN е получена от метастаза в костния мозък на малко дете, диагностицирано с невробластом в IV стадий. Тези клетки са класифицирани като N-тип, което обикновено показва невробластен фенотип, характеризиращ се с висока клетъчна плътност, невронни свойства и способност за обширно разрастване на неврити в култура. Създаването на клетъчната линия GIMEN осигурява ценен модел за изучаване на молекулярните и клетъчните механизми, които са в основата на агресивните форми на невробластом, особено тези, свързани с метастатично разпространение.

Във функционално отношение клетките GIMEN проявяват забележителни взаимодействия с различни цитокини и растежни фактори. По-конкретно, техният растеж се потиска от интерферон-гама (IFN-гама) - цитокин, известен с антипролиферативния си ефект върху някои ракови клетки. Освен това, фибробластният растежен фактор-2 (FGF-2) демонстрира антимитогенен ефект върху тези клетки, който може да бъде обърнат чрез добавяне на IFN-gamma. Този обрат предполага сложно взаимодействие между тези фактори при модулирането на клетъчната пролиферация. Освен това интерлевкин-1 бета (IL-1 бета) засилва антимитогенния ефект на FGF-2, което показва потенциалната му роля в регулирането на динамиката на туморния растеж в микросредата на невробластома. Тези взаимодействия подчертават полезността на клетъчната линия GIMEN за изследване на влиянието на цитокините и растежните фактори върху прогресията на невробластома и отговора към терапията.

Тъкан
Мозък
Заболяване
Невробластом
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Време за удвояване
25 часа

04Идентификатори

Източник
GIMEN (каталожен номер 300179 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1232

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
2 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
3,5 години
Етническа принадлежност
Кавказки