Prejsť na obsah
Bunky GIMEN
Tkanivo
Mozog
Choroba
Neuroblastóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumenty

Bunky GIMEN

Cell line · Číslo výrobku 300179

Bunka GIMEN pochádza z metastázy v kostnej dreni malého dieťaťa, u ktorého bol diagnostikovaný neuroblastóm v štádiu IV. Tieto bunky sú klasifikované ako typ N...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia GIMEN je odvodená z metastáz kostnej drene malého dieťaťa s diagnózou neuroblastómu v štádiu IV. Tieto bunky sú klasifikované ako typ N, čo zvyčajne označuje neuroblastický fenotyp charakterizovaný vysokou hustotou buniek, neuronálnymi vlastnosťami a schopnosťou rozsiahleho rastu neurónov v kultúre. Vytvorenie bunkovej línie GIMEN poskytuje cenný model na štúdium molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré sú základom agresívnych foriem neuroblastómu, najmä tých, ktoré sú spojené s metastatickým šírením.

Z funkčného hľadiska bunky GIMEN vykazujú pozoruhodné interakcie s rôznymi cytokínmi a rastovými faktormi. Konkrétne ich rast inhibuje interferón-gama (IFN-gama), cytokín známy svojimi antiproliferačnými účinkami na niektoré nádorové bunky. Okrem toho fibroblastový rastový faktor 2 (FGF-2) vykazuje antimitogénny účinok na tieto bunky, ktorý možno zvrátiť pridaním IFN-gama. Tento zvrat naznačuje komplexnú interakciu medzi týmito faktormi pri modulácii proliferácie buniek. Okrem toho interleukín-1 beta (IL-1 beta) zvyšuje antimitogénny účinok FGF-2, čo naznačuje jeho potenciálnu úlohu v regulácii dynamiky rastu nádoru v mikroprostredí neuroblastómu. Tieto interakcie zdôrazňujú užitočnosť bunkovej línie GIMEN pri skúmaní vplyvu cytokínov a rastových faktorov na progresiu neuroblastómu a odpoveď na liečbu.

Tkanivo
Mozog
Choroba
Neuroblastóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Doba zdvojnásobenia
25 hodín

04Identifikátory

Citácia
GIMEN (katalógové číslo Cytion 300179)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 3 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
3,5 roka
Etnická príslušnosť
Kaukazský