Ga naar de inhoud
GIMEN Cellen
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Neuroblastoom
Plaats van uitzaaiingen
Beenmerg
Synoniemen
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Documenten

GIMEN Cellen

Cell line · Productnummer 300179

De GIMEN-cellijn is afkomstig van een beenmergmetastase bij een jong kind bij wie neuroblastoom in stadium IV was vastgesteld. Deze cellen worden ingedeeld als N-type...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De GIMEN-cellijn is afgeleid van de beenmergmetastase van een jong kind met de diagnose stadium IV neuroblastoom. Deze cellen zijn geclassificeerd als N-type, wat typisch duidt op een neuroblastisch fenotype dat wordt gekenmerkt door een hoge celdichtheid, neuronale eigenschappen en het vermogen tot uitgebreide neurietgroei in kweek. De ontwikkeling van de GIMEN cellijn biedt een waardevol model voor het bestuderen van de moleculaire en cellulaire mechanismen die ten grondslag liggen aan agressieve vormen van neuroblastoom, met name die welke geassocieerd worden met metastatische verspreiding.

Functioneel vertonen GIMEN-cellen opmerkelijke interacties met verschillende cytokinen en groeifactoren. Hun groei wordt met name geremd door interferon-gamma (IFN-gamma), een cytokine die bekend staat om zijn antiproliferatieve effecten op bepaalde kankercellen. Verder vertoont fibroblast groeifactor-2 (FGF-2) een antimitogeen effect op deze cellen, dat omgekeerd kan worden door toevoeging van IFN-gamma. Deze omkering suggereert een complexe wisselwerking tussen deze factoren bij het moduleren van de celproliferatie. Bovendien versterkt interleukine-1-bèta (IL-1-bèta) de antimitogene effecten van FGF-2, wat duidt op een mogelijke rol van IL-1-bèta in de regulatie van de tumorgroeidynamiek in de neuroblastoma micro-omgeving. Deze interacties benadrukken het nut van de GIMEN cellijn voor het onderzoeken van de invloed van cytokinen en groeifactoren op de progressie van neuroblastoom en de respons op therapie.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Neuroblastoom
Plaats van uitzaaiingen
Beenmerg
Synoniemen
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Verdubbelingstijd
25 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
GIMEN (Cytion catalogusnummer 300179)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
3,5 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch