Pereiti prie turinio
GIMEN ląstelės
Audinys
Smegenys
Liga
Neuroblastoma
Metastazių vieta
Kaulų čiulpai
Sinonimai
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumentai

GIMEN ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300179

GIMEN ląstelių linija yra gauta iš kaulų čiulpų metastazės, nustatytos mažam vaikui, kuriam buvo diagnozuota IV stadijos neuroblastoma. Šios ląstelės priskiriamos N-tipui...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

GIMEN ląstelių linija gauta iš mažo vaiko, kuriam diagnozuota IV stadijos neuroblastoma, kaulų čiulpų metastazių. Šios ląstelės priskiriamos N tipo ląstelėms, kurios paprastai rodo neuroblastinį fenotipą, pasižymintį dideliu ląstelių tankiu, neuronų savybėmis ir gebėjimu kultūroje plačiai auginti neuritus. GIMEN ląstelių linijos sukūrimas yra vertingas modelis, leidžiantis tirti molekulinius ir ląstelinius mechanizmus, kuriais grindžiamos agresyvios neuroblastomos formos, ypač susijusios su metastaziniu išplitimu.

Funkciniu požiūriu GIMEN ląstelės pasižymi pastebima sąveika su įvairiais citokinais ir augimo veiksniais. Ypač jų augimą slopina interferonas-gama (IFN-gama) - citokinas, pasižymintis antiproliferaciniu poveikiu tam tikroms vėžio ląstelėms. Be to, fibroblastų augimo faktorius-2 (FGF-2) šioms ląstelėms turi antimitogeninį poveikį, kurį galima panaikinti pridėjus IFN-gamma. Šis atvirkštinis poveikis rodo sudėtingą šių veiksnių sąveiką moduliuojant ląstelių proliferaciją. Be to, interleukinas-1 beta (IL-1 beta) sustiprina antimitogeninį FGF-2 poveikį, o tai rodo jo galimą vaidmenį reguliuojant naviko augimo dinamiką neuroblastomos mikroaplinkoje. Ši sąveika rodo GIMEN ląstelių linijos naudą tiriant citokinų ir augimo veiksnių poveikį neuroblastomos progresavimui ir atsakui į gydymą.

Audinys
Smegenys
Liga
Neuroblastoma
Metastazių vieta
Kaulų čiulpai
Sinonimai
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
25 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
GIMEN (Cytion katalogo numeris 300179)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
3,5 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių