
- Tessuto
- Cervello
- Malattia
- Neuroblastoma
- Sito metastatico
- Midollo osseo
- Sinonimi
- Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma
Documenti
Cellule GIMEN
Cell line · Codice prodotto 300179
La linea cellulare GIMEN deriva da una metastasi nel midollo osseo di un bambino piccolo a cui era stato diagnosticato un neuroblastoma in stadio IV. Queste cellule sono classificate come di tipo N...
Personalizzazione / Suggerimenti
- Cellule GIMENCell line€430.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare GIMEN deriva dalle metastasi del midollo osseo di un bambino con diagnosi di neuroblastoma al quarto stadio. Queste cellule sono classificate come di tipo N, che indica tipicamente un fenotipo neuroblastico caratterizzato da un'elevata densità cellulare, proprietà neuronali e capacità di crescita estesa dei neuriti in coltura. La creazione della linea cellulare GIMEN fornisce un modello prezioso per lo studio dei meccanismi molecolari e cellulari alla base delle forme aggressive di neuroblastoma, in particolare quelle associate alla diffusione metastatica.
Dal punto di vista funzionale, le cellule GIMEN mostrano notevoli interazioni con varie citochine e fattori di crescita. In particolare, la loro crescita è inibita dall'interferone-gamma (IFN-gamma), una citochina nota per i suoi effetti antiproliferativi su alcune cellule tumorali. Inoltre, il fattore di crescita dei fibroblasti-2 (FGF-2) dimostra un effetto antimitogeno su queste cellule, che può essere invertito dall'aggiunta di IFN-gamma. Questa inversione suggerisce una complessa interazione tra questi fattori nella modulazione della proliferazione cellulare. Inoltre, l'interleuchina-1 beta (IL-1 beta) potenzia gli effetti antimitogeni di FGF-2, indicando il suo ruolo potenziale nella regolazione delle dinamiche di crescita tumorale nel microambiente del neuroblastoma. Queste interazioni evidenziano l'utilità della linea cellulare GIMEN per esplorare l'impatto delle citochine e dei fattori di crescita sulla progressione del neuroblastoma e sulla risposta alla terapia.
- Tessuto
- Cervello
- Malattia
- Neuroblastoma
- Sito metastatico
- Midollo osseo
- Sinonimi
- Gi-ME-N
- Gi-MEN
- GI-ME-N
- Gimen
- Gimen1
- Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tempo di raddoppio
- 25 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- GIMEN (numero di catalogo Cytion 300179)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1232
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- Da 2 a 3 x 104 cellule/cm2
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Età dei donatori
- 3,5 anni
- Etnia
- Caucasico
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì