Gå til innholdet
GIMEN-celler
Vev
Hjerne
Sykdom
Nevroblastom
Metastaseområde
Benmarg
Synonymer
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumenter

GIMEN-celler

Cell line · Produktnummer 300179

GIMEN-cellelinjen stammer fra en benmargsmetastase hos et lite barn som fikk diagnosen nevroblastom i stadium IV. Disse cellene er klassifisert som N-type...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

GIMEN-cellelinjen er avledet fra benmargsmetastaser fra et lite barn som ble diagnostisert med nevroblastom i stadium IV. Disse cellene er klassifisert som N-type, noe som vanligvis indikerer en nevroblasttisk fenotype som kjennetegnes av høy celletetthet, nevronale egenskaper og evne til omfattende nevrittutvekst i kultur. Etableringen av GIMEN-cellelinjen er en verdifull modell for å studere de molekylære og cellulære mekanismene som ligger til grunn for aggressive former for nevroblastom, særlig de som er forbundet med metastatisk spredning.

GIMEN-celler har en bemerkelsesverdig interaksjon med ulike cytokiner og vekstfaktorer. Spesielt hemmes veksten av interferon-gamma (IFN-gamma), et cytokin som er kjent for sine antiproliferative effekter på visse kreftceller. Videre har fibroblastvekstfaktor-2 (FGF-2) en antimitogen effekt på disse cellene, som kan reverseres ved tilsetning av IFN-gamma. Denne reverseringen tyder på et komplekst samspill mellom disse faktorene når det gjelder å modulere celleproliferasjonen. I tillegg forsterker interleukin-1 beta (IL-1 beta) den antimitogene effekten av FGF-2, noe som tyder på at det kan spille en rolle i reguleringen av tumorvekstdynamikken i nevroblastomets mikromiljø. Disse interaksjonene understreker GIMEN-cellelinjens anvendelighet i utforskningen av cytokiners og vekstfaktorers innvirkning på utviklingen av nevroblastom og respons på behandling.

Vev
Hjerne
Sykdom
Nevroblastom
Metastaseområde
Benmarg
Synonymer
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Fordoblingstid
25 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
GIMEN (Cytion-katalognummer 300179)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 til 3 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
3,5 år
Etnisitet
Kaukasisk