Preskoči na vsebino
Celice GIMEN
Tkivo
Možgani
Bolezen
Nevroblastom
Mesto metastaze
Kostni mozeg
Sinonimi
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumenti

Celice GIMEN

Cell line · Številka izdelka 300179

Celična linija GIMEN izhaja iz metastaze v kostnem mozgu pri majhnem otroku, pri katerem je bil diagnosticiran nevroblastom v IV. stopnji. Te celice so uvrščene v tip N...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija GIMEN je pridobljena iz metastaz kostnega mozga majhnega otroka z diagnozo nevroblastoma IV. stopnje. Te celice so razvrščene v tip N, ki običajno označuje nevroblastični fenotip, za katerega je značilna visoka gostota celic, nevronske lastnosti in zmožnost obsežne rasti nevritov v kulturi. Vzpostavitev celične linije GIMEN zagotavlja dragocen model za preučevanje molekularnih in celičnih mehanizmov, na katerih temeljijo agresivne oblike nevroblastoma, zlasti tiste, povezane z metastatskim širjenjem.

Funkcionalno so celice GIMEN značilne za interakcije z različnimi citokini in rastnimi dejavniki. Zlasti njihovo rast zavira interferon gama (IFN-gama), citokin, ki je znan po svojih antiproliferativnih učinkih na nekatere rakave celice. Poleg tega fibroblastni rastni faktor 2 (FGF-2) na te celice deluje antimitogeno, kar se lahko spremeni z dodajanjem IFN-gamma. Ta obrat kaže na zapleteno medsebojno delovanje teh dejavnikov pri uravnavanju celične proliferacije. Poleg tega interlevkin-1 beta (IL-1 beta) okrepi antimitogene učinke FGF-2, kar kaže na njegovo morebitno vlogo pri uravnavanju dinamike rasti tumorja v mikrookolju nevroblastoma. Te interakcije poudarjajo uporabnost celične linije GIMEN pri raziskovanju vpliva citokinov in rastnih dejavnikov na napredovanje nevroblastoma in odziv na zdravljenje.

Tkivo
Možgani
Bolezen
Nevroblastom
Mesto metastaze
Kostni mozeg
Sinonimi
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Čas podvojitve
25 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
GIMEN (Cytionova kataloška številka 300179)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
3,5 leta
Etnična pripadnost
Kavkaški