İçeriğe atla
GIMEN Hücreleri
Doku
Beyin
Hastalık
Nöroblastom
Metastaz yeri
Kemik iliği
Eş anlamlılar
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

GIMEN Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300179

GIMEN hücre hattı, evre IV nöroblastom teşhisi konmuş küçük bir çocuğun kemik iliği metastazından elde edilmiştir. Bu hücreler N-tipi olarak sınıflandırılır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

GIMEN hücre hattı, evre IV nöroblastom tanısı konan küçük bir çocuğun kemik iliği metastazından elde edilmiştir. Bu hücreler, tipik olarak yüksek hücre yoğunluğu, nöronal özellikler ve kültürde kapsamlı nörit büyümesi yeteneği ile karakterize edilen nöroblastik bir fenotipi gösteren N-tipi olarak sınıflandırılır. GIMEN hücre hattının kurulması, özellikle metastatik yayılımla ilişkili olanlar olmak üzere agresif nöroblastom formlarının altında yatan moleküler ve hücresel mekanizmaların incelenmesi için değerli bir model sağlamaktadır.

İşlevsel olarak, GIMEN hücreleri çeşitli sitokinler ve büyüme faktörleri ile kayda değer etkileşimler sergiler. Özellikle, büyümeleri, belirli kanser hücreleri üzerindeki antiproliferatif etkileriyle bilinen bir sitokin olan interferon-gama (IFN-gama) tarafından inhibe edilir. Ayrıca, fibroblast büyüme faktörü-2 (FGF-2) bu hücreler üzerinde IFN-gama ilavesiyle tersine çevrilebilen antimitojenik bir etki gösterir. Bu tersine çevirme, hücre çoğalmasının modüle edilmesinde bu faktörler arasında karmaşık bir etkileşim olduğunu göstermektedir. Ayrıca, interlökin-1 beta (IL-1 beta), FGF-2'nin antimitojenik etkilerini artırarak nöroblastom mikroçevresinde tümör büyüme dinamiklerinin düzenlenmesindeki potansiyel rolüne işaret etmektedir. Bu etkileşimler, GIMEN hücre hattının sitokinlerin ve büyüme faktörlerinin nöroblastom progresyonu ve tedaviye yanıt üzerindeki etkisini araştırmadaki faydasını vurgulamaktadır.

Doku
Beyin
Hastalık
Nöroblastom
Metastaz yeri
Kemik iliği
Eş anlamlılar
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
İki katına çıkma süresi
25 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
GIMEN (Cytion katalog numarası 300179)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
3,5 yıl
Etnik köken
Kafkas