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IPEC-J2
Tissu
Intestin grêle, jéjunum
Maladie
Normal
Synonymes
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

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IPEC-J2

Cell line · Référence du produit 305571

La lignée cellulaire IPEC-J2 est une lignée cellulaire épithéliale permanente non transformée, issue de l'épithélium jéjunal d'un porcelet nouveau-né non allaité. IPEC-J2 ce...

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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire IPEC-J2 est une lignée cellulaire épithéliale permanente non transformée, dérivée de l'épithélium jéjunal d'un porcelet nouveau-né non allaité. Les cellules IPEC-J2 conservent les caractéristiques structurelles et fonctionnelles des entérocytes matures, ce qui en fait un excellent modèle pour l'étude de la physiologie et de la pathologie intestinales. Ces cellules forment une monocouche polarisée dotée de jonctions serrées et présentent une résistance électrique transépithéliale (TEER) élevée, ce qui est essentiel pour l'étude des fonctions de barrière épithéliale et de la perméabilité. En raison de leur origine porcine, les cellules IPEC-J2 reproduisent plus fidèlement la physiologie intestinale humaine que les lignées dérivées de rongeurs telles que IEC-6 et IEC-18, ce qui renforce leur pertinence dans la recherche zoonotique et comparative.

Sur le plan fonctionnel, les cellules IPEC-J2 expriment des marqueurs clés et des cytokines associés aux réponses immunitaires, tels que le TNF-α et le GM-CSF, et possèdent toute une gamme de récepteurs de type Toll (TLR) qui facilitent les études sur les interactions entre les agents pathogènes et l’hôte. Cela les a rendues inestimables pour la recherche microbiologique, en particulier pour l’étude des interactions avec des agents pathogènes tels que *Salmonella enterica* et *Escherichia coli* pathogène. Elles ont également été utilisées pour évaluer les effets des probiotiques et des compléments alimentaires sur la santé intestinale, avec des applications comprenant notamment l’évaluation des réponses anti-inflammatoires et cytoprotectrices.

Les recherches menées sur les cellules IPEC-J2 ont porté sur leurs réponses au stress oxydatif et leurs mécanismes de protection. Par exemple, il a été démontré que le glutathion (GSH) exogène protège les cellules IPEC-J2 des dommages oxydatifs en renforçant la fonction mitochondriale, en améliorant le potentiel membranaire mitochondrial et en réduisant l’accumulation d’espèces réactives de l’oxygène (ERO). Ces résultats soulignent l’utilité des cellules IPEC-J2 dans l’étude des réponses épithéliales au stress et des interventions thérapeutiques potentielles visant à maintenir l’intégrité de la barrière intestinale.

Tissu
Intestin grêle, jéjunum
Maladie
Normal
Synonymes
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Classification

Organisme
Porc
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Entérocyte

04Identifiants

Référence
IPEC-J2 (référence Cytion 305571)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utiliser 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec TrypLE Express, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1-3 × 10⁴/cm²
Renouvellement des fluides
1 à 2 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
Nouveau-né