IPEC-J2

Linia komórkowa IPEC-J2 to nietransformowana, stała linia komórek nabłonkowych pochodząca z nabłonka jelita czczego noworodkowego prosiaka, który nie był karmiony mlekiem matki. Komórki IPEC-J2 zachowują cechy strukturalne i funkcjonalne dojrzałych enterocytów, co czyni je doskonałym modelem do badania fizjologii i patologii jelit. Komórki te tworzą spolaryzowaną monowarstwę z połączeniami ścisłymi i wykazują wysoką transepithelialną rezystancję elektryczną (TEER), co jest niezbędne do badania funkcji bariery nabłonkowej i jej przepuszczalności. Ze względu na swoje świńskie pochodzenie komórki IPEC-J2 bardziej wiernie odzwierciedlają fizjologię jelit człowieka w porównaniu z liniami pochodzącymi od gryzoni, takimi jak IEC-6 i IEC-18, co zwiększa ich znaczenie w badaniach nad chorobami odzwierzęcymi oraz badaniach porównawczych.

Pod względem funkcjonalnym komórki IPEC-J2 wyrażają kluczowe markery i cytokiny związane z odpowiedziami immunologicznymi, takie jak TNF-α i GM-CSF, oraz posiadają szereg receptorów typu Toll-podobnego (TLR), które ułatwiają badania nad interakcjami między patogenami a gospodarzem. Dzięki temu stały się one nieocenionym narzędziem w badaniach mikrobiologicznych, szczególnie w analizie interakcji z patogenami, takimi jak *Salmonella enterica* i patogenna *Escherichia coli*. Wykorzystuje się je również do oceny wpływu probiotyków i suplementów diety na zdrowie jelit, a ich zastosowania obejmują między innymi ocenę odpowiedzi przeciwzapalnych i cytoprotekcyjnych.

W badaniach z wykorzystaniem komórek IPEC-J2 analizowano ich reakcje na stres oksydacyjny oraz mechanizmy ochronne. Na przykład wykazano, że egzogenny glutation (GSH) chroni komórki IPEC-J2 przed uszkodzeniami oksydacyjnymi poprzez wzmocnienie funkcji mitochondriów, poprawę potencjału błony mitochondrialnej oraz zmniejszenie gromadzenia się reaktywnych form tlenu (ROS). Odkrycia te podkreślają przydatność komórek IPEC-J2 w badaniu reakcji nabłonkowych na stres oraz potencjalnych interwencji terapeutycznych mających na celu utrzymanie integralności bariery jelitowej.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym