Mine otse sisu juurde
IPEC-J2
Kude
Peensoole, jejunum
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumendid

IPEC-J2

Cell line · Toote number 305571

IPEC-J2 rakuliin on mittetransformeeritud püsiv epiteelirakuliin, mis on saadud vastsündinud, imetamata põrsakese jejunumi epiteelist. IPEC-J2 ra...

€420.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

IPEC-J2 rakuliin on mittetransformeeritud püsiv epiteelirakuliin, mis on saadud vastsündinud, imetamata põrsakese jejunumi epiteelist. IPEC-J2 rakud säilitavad küpsete enterotsüütide struktuurilised ja funktsionaalsed omadused, mis teeb neist suurepärase mudeli soole füsioloogia ja patoloogia uurimiseks. Need rakud moodustavad polariseeritud monokihi tihedate liidestega ja neil on kõrge transepiteelne elektriline takistus (TEER), mis on oluline epiteelbarjääri funktsioonide ja läbilaskvuse uurimiseks. Tänu oma sigade päritolule jäljendavad IPEC-J2 rakud inimese soolefüsioloogiat täpsemalt kui närilistelt pärinevad liinid, nagu IEC-6 ja IEC-18, mis suurendab nende asjakohasust zoonootilistes ja võrdlevates uuringutes.

Funktsionaalselt ekspresseerivad IPEC-J2 rakud immuunvastustega seotud võtmemarkereid ja tsütokiine, nagu TNF-α ja GM-CSF, ning neil on mitmesuguseid toll-like retseptoreid (TLR-e), mis hõlbustavad patogeeni ja peremehe vaheliste interaktsioonide uurimist. See on muutnud need rakud hindamatuks mikrobioloogilistes uuringutes, eriti suhtlemise uurimisel selliste patogeenidega nagu *Salmonella enterica* ja patogeenne *Escherichia coli*. Neid on kasutatud ka probiootikumide ja toidulisandite mõju hindamiseks soole tervisele, sealhulgas põletikuvastaste ja tsütoprotektiivsete reaktsioonide hindamisel.

IPEC-J2-ga seotud uuringutes on uuritud nende reaktsioone oksüdatiivsele stressile ja nende kaitsemehhanisme. Näiteks on näidatud, et eksogeenne glutatioon (GSH) kaitseb IPEC-J2 rakke oksüdatiivse kahjustuse eest, tugevdades mitokondrite funktsiooni, parandades mitokondrite membraanipotentsiaali ja vähendades reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) kogunemist. Need tulemused rõhutavad IPEC-J2 kasulikkust epiteeli stressireaktsioonide uurimisel ja potentsiaalsete terapeutiliste sekkumiste väljatöötamisel soolebarjääri terviklikkuse säilitamiseks.

Kude
Peensoole, jejunum
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Klassifikatsioon

Organism
Siga
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
entotsüüt

04Tunnused

Viide
IPEC-J2 (Cytioni katalooginumber 305571)
NCBI maksukood
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
1–2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Vastsündinu