Prejsť na obsah
IPEC-J2
Tkanivo
Tenké črevo, jejunum
Choroba
Normálne
Synonymá
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumenty

IPEC-J2

Cell line · Číslo výrobku 305571

Bunka IPEC-J2 je netransformovaná, trvalá epitelová bunka odvodená z epitelu jejuna novorodeného, nekojeného prasiatka. IPEC-J2 ce...

€420.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka IPEC-J2 je netransformovaná, trvalá epiteliálna bunka odvodená z epitelu jejuna novorodeného, nekojeného prasiatka. Bunky IPEC-J2 si zachovávajú štrukturálne a funkčné charakteristiky zrelých enterocytov, čo z nich robí vynikajúci model na štúdium fyziológie a patológie čreva. Tieto bunky tvoria polarizovanú monovrstvu s tesnými spojmi a vykazujú vysoký transepiteliálny elektrický odpor (TEER), čo je nevyhnutné na skúmanie funkcií a permeability epiteliálnej bariéry. Vďaka svojmu prasačiemu pôvodu bunky IPEC-J2 vernejšie napodobňujú fyziológiu ľudského čreva v porovnaní s líniami odvodenými z hlodavcov, ako sú IEC-6 a IEC-18, čo zvyšuje ich význam v zoonotickom a komparatívnom výskume.

Z funkčného hľadiska bunky IPEC-J2 exprimujú kľúčové markery a cytokíny spojené s imunitnými reakciami, ako sú TNF-α a GM-CSF, a disponujú radom toll-like receptorov (TLR), ktoré uľahčujú štúdium interakcií medzi patogénom a hostiteľom. Vďaka tomu sú neoceniteľné pre mikrobiologický výskum, najmä pri skúmaní interakcií s patogénmi, ako sú *Salmonella enterica* a patogénna *Escherichia coli*. Využívajú sa tiež na hodnotenie účinkov probiotík a výživových doplnkov na zdravie čriev, pričom medzi ich aplikácie patrí aj posudzovanie protizápalových a cytoprotektívnych reakcií.

Výskum s využitím buniek IPEC-J2 sa zameral na ich reakcie na oxidačný stres a ich ochranné mechanizmy. Napríklad sa preukázalo, že exogénny glutatión (GSH) chráni bunky IPEC-J2 pred oxidačným poškodením tým, že posilňuje mitochondriálnu funkciu, zlepšuje mitochondriálny membránový potenciál a znižuje akumuláciu reaktívnych foriem kyslíka (ROS). Tieto zistenia zdôrazňujú užitočnosť buniek IPEC-J2 pri štúdiu epiteliálnych reakcií na stres a potenciálnych terapeutických intervencií na udržanie integrity črevnej bariéry.

Tkanivo
Tenké črevo, jejunum
Choroba
Normálne
Synonymá
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Klasifikácia

Organizmus
Prase
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Enterocyt

04Identifikátory

Citácia
IPEC-J2 (katalógové číslo spoločnosti Cytion 305571)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne zakryte prípravkom TrypLE Express, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
1 až 2-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Novorodenec