Pereiti prie turinio
IPEC-J2
Audinys
Plonoji žarna, tuščioji žarna
Liga
Normalus
Sinonimai
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumentai

IPEC-J2

Cell line · Prekės numeris 305571

IPEC-J2 ląstelių linija yra netransformuota, nuolatinė epitelio ląstelių linija, gauta iš naujagimio, nemaitinto paršeliuko tuščiosios žarnos epitelio. IPEC-J2 ląstelės...

€420.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

IPEC-J2 ląstelių linija yra netransformuota, nuolatinė epitelio ląstelių linija, gauta iš naujagimio, nemaitinto paršeliuko tuščiosios žarnos epitelio. IPEC-J2 ląstelės išlaiko subrendusių enterocitų struktūrines ir funkcines savybes, todėl jos yra puikus modelis žarnyno fiziologijos ir patologijos tyrimams. Šios ląstelės sudaro poliarizuotą monosluoksnį su glaudžiais jungimais ir pasižymi didele transepiteline elektrine varža (TEER), kuri yra būtina epitelio barjero funkcijų ir pralaidumo tyrimams. Dėl kiaulės kilmės IPEC-J2 ląstelės labiau atkuria žmogaus žarnyno fiziologiją, palyginti su graužikų kilmės linijomis, tokiomis kaip IEC-6 ir IEC-18, todėl jos yra ypač tinkamos zoonozinių ir lyginamųjų tyrimų srityje.

Funkciniu požiūriu IPEC-J2 ląstelės ekspresuoja pagrindinius žymenis ir citokinus, susijusius su imuniniais atsakais, pavyzdžiui, TNF-α ir GM-CSF, bei turi įvairių „Toll-like“ receptorių (TLR), kurie palengvina tyrimus apie patogenų ir šeimininko sąveikas. Dėl to jos tapo nepakeičiamos mikrobiologiniuose tyrimuose, ypač tiriant sąveiką su patogenais, tokiais kaip *Salmonella enterica* ir patogeninė *Escherichia coli*. Jos taip pat buvo naudojamos vertinant probiotikų ir maisto papildų poveikį žarnyno sveikatai, įskaitant uždegimą slopinančių ir ląsteles apsaugančių reakcijų vertinimą.

Tyrimuose su IPEC-J2 ląstelėmis buvo tiriamos jų reakcijos į oksidacinį stresą ir jų apsauginiai mechanizmai. Pavyzdžiui, nustatyta, kad egzogeninis glutationas (GSH) apsaugo IPEC-J2 ląsteles nuo oksidacinės žalos, stiprindamas mitochondrijų funkciją, gerindamas mitochondrijų membranos potencialą ir mažindamas reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) kaupimąsi. Šie rezultatai pabrėžia IPEC-J2 naudą tiriant epitelio reakcijas į stresą ir galimas terapines intervencijas, skirtas žarnyno barjero vientisumui išlaikyti.

Audinys
Plonoji žarna, tuščioji žarna
Liga
Normalus
Sinonimai
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Klasifikacija

Organizmas
Kiaulė
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Enterocitas

04Identifikatoriai

Nuoroda
IPEC-J2 (Cytion katalogo numeris 305571)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tada visiškai užtepkite "TrypLE Express", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
1–2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Naujagimis