Ga naar de inhoud
IPEC-J2
Weefsel
Dunne darm, jejunum
Ziekte
Normaal
Synoniemen
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Documenten

IPEC-J2

Cell line · Productnummer 305571

De IPEC-J2-cellijn is een niet-getransformeerde, permanente epitheelcellijn die is afgeleid van het jejunale epitheel van een pasgeboren, niet-gezogd biggetje. IPEC-J2 ce...

€420.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De IPEC-J2-cellijn is een niet-getransformeerde, permanente epitheelcellijn die is afgeleid van het jejunale epitheel van een pasgeboren, niet-gezogd biggetje. IPEC-J2-cellen behouden de structurele en functionele kenmerken van volgroeide enterocyten, waardoor ze een uitstekend model vormen voor het bestuderen van de darmfysiologie en -pathologie. Deze cellen vormen een gepolariseerde monolaag met tight junctions en vertonen een hoge transepitheliale elektrische weerstand (TEER), wat essentieel is voor het onderzoeken van de functies en de permeabiliteit van de epitheliale barrière. Vanwege hun varkensafkomst bootsen IPEC-J2-cellen de menselijke darmfysiologie beter na dan van knaagdieren afkomstige lijnen zoals IEC-6 en IEC-18, wat hun relevantie in zoönotisch en vergelijkend onderzoek vergroot.

Functioneel gezien brengen IPEC-J2-cellen belangrijke markers en cytokines tot expressie die verband houden met immuunreacties, zoals TNF-α en GM-CSF, en beschikken ze over een reeks toll-like receptoren (TLR’s) die onderzoek naar interacties tussen pathogenen en de gastheer vergemakkelijken. Dit maakt ze van onschatbare waarde voor microbiologisch onderzoek, met name bij het bestuderen van interacties met pathogenen zoals *Salmonella enterica* en pathogene *Escherichia coli*. Ze worden ook ingezet om de effecten van probiotica en voedingssupplementen op de darmgezondheid te evalueren, met toepassingen zoals het beoordelen van ontstekingsremmende en cytoprotectieve reacties.

Onderzoek met IPEC-J2 heeft hun reacties op oxidatieve stress en hun beschermende mechanismen onderzocht. Zo is bijvoorbeeld aangetoond dat exogeen glutathion (GSH) IPEC-J2-cellen beschermt tegen oxidatieve schade door de mitochondriale functie te versterken, de mitochondriale membraanpotentiaal te verbeteren en de ophoping van reactieve zuurstofsoorten (ROS) te verminderen. Deze bevindingen onderstrepen het nut van IPEC-J2 bij het bestuderen van epitheliale stressreacties en mogelijke therapeutische interventies voor het behoud van de integriteit van de darmbarrière.

Weefsel
Dunne darm, jejunum
Ziekte
Normaal
Synoniemen
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Classificatie

Organisme
Varken
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Enterocyt

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
IPEC-J2 (Cytion-catalogusnummer 305571)
NCBI-belastingnummer
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
1 tot 2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
Pasgeboren