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IPEC-J2
ティッシュ
小腸、空腸
病気
ノーマル
同義語
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

IPEC-J2

Cell line · 製品番号 305571

IPEC-J2細胞株は、生後間もない、母乳を飲んでいない子豚の空腸上皮から樹立された、非形質転換の恒久的な上皮細胞株である。IPEC-J2細胞...

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01概要

説明

IPEC-J2細胞株は、生後間もない、母乳を飲んでいない子豚の空腸上皮由来の、非形質転換の恒久的な上皮細胞株である。 IPEC-J2細胞は、成熟した腸上皮細胞の構造的および機能的特徴を維持しており、腸の生理学および病理学を研究するための優れたモデルとなっています。これらの細胞は、タイトジャンクションを有する分極化した単層を形成し、高い上皮横断電気抵抗(TEER)を示します。これは、上皮バリア機能や透過性を調査する上で不可欠な特性です。 IPEC-J2細胞はブタ由来であるため、IEC-6やIEC-18のような齧歯類由来の細胞株と比較して、ヒトの腸の生理機能をより忠実に再現しており、人獣共通感染症や比較研究における有用性を高めています。

機能面では、IPEC-J2細胞は、TNF-αやGM-CSFなど、免疫応答に関連する主要なマーカーやサイトカインを発現しており、病原体と宿主の相互作用に関する研究を促進するさまざまなToll様受容体(TLR)を保有している。 このため、IPEC-J2細胞は微生物学的研究、特に*Salmonella enterica*や病原性*Escherichia coli*といった病原体との相互作用の解明において、極めて貴重な存在となっています。また、プロバイオティクスや栄養補助食品が腸の健康に及ぼす影響を評価するためにも用いられており、抗炎症反応や細胞保護反応の評価などの用途があります。

IPEC-J2を用いた研究では、酸化ストレスに対する反応やその防御メカニズムが解明されてきた。 例えば、外因性のグルタチオン(GSH)は、ミトコンドリア機能を強化し、ミトコンドリア膜電位を改善し、活性酸素種(ROS)の蓄積を減少させることで、IPEC-J2細胞を酸化損傷から保護することが示されている。これらの知見は、上皮細胞のストレス応答の研究や、腸管バリア機能の維持に向けた潜在的な治療的介入において、IPEC-J2が有用であることを裏付けている。

ティッシュ
小腸、空腸
病気
ノーマル
同義語
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02分類

生物
ブタ
セックス
未指定
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
腸上皮細胞

04識別子

引用
IPEC-J2(Cytionカタログ番号 305571)
NCBI 納税者番号
9823
セロサウルス
CVCL_2246

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3~5ml、T75フラスコでは5~10mlのPBSを使用する。次に、TrypLE Expressで細胞を完全に覆い、T25フラスコでは1~2 ml、T75フラスコでは2.5 mlを使用する。室温で8~10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1-3×10^4/cm²
流体の更新
週に1~2回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
新生児