IPEC-J2

IPEC-J2-solulinja on muuntumaton, pysyvä epiteelisolulinja, joka on peräisin vastasyntyneen, imettämättömän porsaan jejunum-epiteelistä. IPEC-J2-solut säilyttävät kypsien enterosyyttien rakenteelliset ja toiminnalliset ominaisuudet, mikä tekee niistä erinomaisen mallin suoliston fysiologian ja patologian tutkimiseen. Nämä solut muodostavat polarisoituneen yksikerroksen, jossa on tiiviitä liitoksia, ja niillä on korkea transepiteelinen sähköinen vastus (TEER), mikä on olennaista epiteelibarrierin toimintojen ja läpäisevyyden tutkimiselle. Sian alkuperänsä ansiosta IPEC-J2-solut jäljittelevät ihmisen suoliston fysiologiaa tarkemmin kuin jyrsijöistä peräisin olevat solulinjat, kuten IEC-6 ja IEC-18, mikä lisää niiden merkitystä zoonoottisessa ja vertailevassa tutkimuksessa.

Toiminnallisesti IPEC-J2-solut ilmentävät immuunivasteisiin liittyviä avainmarkkereita ja sytokiineja, kuten TNF-α:ta ja GM-CSF:ää, ja niillä on useita toll-kaltaisia reseptoreita (TLR:iä), jotka helpottavat patogeenin ja isännän välisten vuorovaikutusten tutkimusta. Tämä on tehnyt niistä korvaamattomia mikrobiologisessa tutkimuksessa, erityisesti tutkittaessa vuorovaikutusta patogeenien, kuten *Salmonella enterica*:n ja patogeenisen *Escherichia coli*:n, kanssa. Niitä on käytetty myös probioottien ja ravintolisien vaikutusten arvioimiseen suoliston terveyteen, ja sovelluksiin kuuluu muun muassa tulehdusta hillitsevien ja soluja suojaavien vasteiden arviointi.

IPEC-J2-soluja koskevassa tutkimuksessa on selvitetty niiden reaktioita oksidatiiviseen stressiin ja niiden suojamekanismeja. Esimerkiksi on osoitettu, että eksogeeninen glutationi (GSH) suojaa IPEC-J2-soluja oksidatiivisilta vaurioilta parantamalla mitokondrioiden toimintaa, kohentamalla mitokondrioiden kalvopotentiaalia ja vähentämällä reaktiivisten happiyhdisteiden (ROS) kertymistä. Nämä havainnot korostavat IPEC-J2:n hyödyllisyyttä epiteelisolujen stressivasteiden tutkimuksessa sekä mahdollisissa terapeuttisissa toimenpiteissä suoliston esteen eheyden ylläpitämiseksi.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa