Tartalomra ugrás
IPEC-J2
Szövet
Vékonybél, jejunum
Betegség
Normál
Szinonimák
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumentumok

IPEC-J2

Cell line · Termékszám 305571

Az IPEC-J2 sejtvonal egy nem transzformált, állandó epiteliális sejtvonal, amelyet egy újszülött, szoptatás nélkül nevelt malac jejunális epitéliumából nyertek. Az IPEC-J2 sejtvonal...

€420.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az IPEC-J2 sejtvonal egy nem transzformált, állandó epiteliális sejtvonal, amelyet egy újszülött, szoptatás nélkül nevelt malac jejunális epitéliumából nyertek. Az IPEC-J2 sejtek megőrzik az érett enterociták szerkezeti és funkcionális jellemzőit, így kiváló modellt nyújtanak a bélfiziológia és -patológia tanulmányozásához. Ezek a sejtek szoros kapcsolódási pontokkal rendelkező polarizált monoréteget alkotnak, és magas transepiteliális elektromos ellenállást (TEER) mutatnak, ami elengedhetetlen az epiteliális gátfunkciók és a permeabilitás vizsgálatához. Sertés eredetüknek köszönhetően az IPEC-J2 sejtek az IEC-6 és IEC-18-hoz hasonló, rágcsálókból származó vonalakhoz képest pontosabban utánozzák az emberi bélfiziológiát, ami növeli jelentőségüket a zoonózisokkal kapcsolatos és összehasonlító kutatásokban.

Funkcionális szempontból az IPEC-J2 sejtek az immunválaszokkal kapcsolatos kulcsfontosságú markereket és citokineket fejezik ki, mint például a TNF-α és a GM-CSF, valamint számos toll-szerű receptorral (TLR) rendelkeznek, amelyek megkönnyítik a kórokozó-gazda kölcsönhatások vizsgálatát. Ez felbecsülhetetlen értékűvé tette őket a mikrobiológiai kutatások számára, különösen a *Salmonella enterica* és a patogén *Escherichia coli* kórokozókkal való kölcsönhatások vizsgálatában. Emellett a probiotikumok és étrend-kiegészítők bélrendszeri egészségre gyakorolt hatásainak értékelésére is alkalmazzák őket, többek között a gyulladáscsökkentő és sejtvédő válaszok felmérésére.

Az IPEC-J2-vel kapcsolatos kutatások feltárták a sejtek oxidatív stresszre adott válaszreakcióit és védelmi mechanizmusait. Például kimutatták, hogy az exogén glutation (GSH) a mitokondriális funkció fokozásával, a mitokondriális membránpotenciál javításával és a reaktív oxigénszármazékok (ROS) felhalmozódásának csökkentésével védi az IPEC-J2 sejteket az oxidatív károsodástól. Ezek az eredmények alátámasztják az IPEC-J2 hasznosságát a hámsejtek stresszválaszainak tanulmányozásában, valamint a bélbarrier integritásának fenntartását célzó potenciális terápiás beavatkozások kutatásában.

Szövet
Vékonybél, jejunum
Betegség
Normál
Szinonimák
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Osztályozás

Organizmus
Sertés
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Enterocita

04Azonosítók

Hivatkozás
IPEC-J2 (Cytion katalógusszám: 305571)
NCBI adóazonosító szám
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen TrypLE Express-szel, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. Hagyjuk a sejteket 8-10 percig szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
Hetente 1–2 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Újszülött