İçeriğe atla
IPEC-J2
Doku
İnce bağırsak, jejunum
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

IPEC-J2

Cell line · Ürün numarası 305571

IPEC-J2 hücre hattı, emzirilmemiş bir yenidoğan domuz yavrusunun jejunum epitelinden elde edilmiş, transformasyona uğramamış, kalıcı bir epitel hücre hattıdır. IPEC-J2 hücre...

€420.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

IPEC-J2 hücre hattı, emzirilmemiş bir yenidoğan domuz yavrusunun jejunum epitelinden elde edilen, transformasyona uğramamış, kalıcı bir epitel hücre hattıdır. IPEC-J2 hücreleri, olgun enterositlerin yapısal ve işlevsel özelliklerini korur; bu da onları bağırsak fizyolojisi ve patolojisini incelemek için mükemmel bir model haline getirir. Bu hücreler, sıkı bağlantılara sahip polarize bir tek tabaka oluşturur ve epitel bariyer işlevlerini ve geçirgenliğini araştırmak için gerekli olan yüksek transepitelyal elektrik direnci (TEER) sergiler. Domuz kökenli olmaları nedeniyle, IPEC-J2 hücreleri, IEC-6 ve IEC-18 gibi kemirgen kaynaklı hücre hatlarına kıyasla insan bağırsak fizyolojisini daha yakından taklit eder; bu da zoonotik ve karşılaştırmalı araştırmalardaki önemlerini artırır.

İşlevsel olarak, IPEC-J2 hücreleri, TNF-α ve GM-CSF gibi bağışıklık tepkileriyle ilişkili temel belirteçleri ve sitokinleri eksprese eder ve patojen-konakçı etkileşimleri üzerine yapılan çalışmaları kolaylaştıran çeşitli toll benzeri reseptörlere (TLR'ler) sahiptir. Bu özellikleri, özellikle *Salmonella enterica* ve patojenik *Escherichia coli* gibi patojenlerle etkileşimlerin incelenmesinde mikrobiyolojik araştırmalar için paha biçilmez bir değer kazandırmıştır. Ayrıca, probiyotiklerin ve besin takviyelerinin bağırsak sağlığı üzerindeki etkilerini değerlendirmek amacıyla da kullanılmaktadır; bu uygulamalar arasında anti-inflamatuar ve hücre koruyucu yanıtların değerlendirilmesi de yer almaktadır.

IPEC-J2'yi içeren araştırmalar, bu hücrelerin oksidatif strese verdiği tepkileri ve koruyucu mekanizmalarını incelemiştir. Örneğin, eksojen glutatyonun (GSH), mitokondriyal fonksiyonu güçlendirerek, mitokondriyal membran potansiyelini iyileştirerek ve reaktif oksijen türlerinin (ROS) birikimini azaltarak IPEC-J2 hücrelerini oksidatif hasardan koruduğu gösterilmiştir. Bu bulgular, epitelyal stres tepkilerinin incelenmesinde ve bağırsak bariyer bütünlüğünü korumaya yönelik potansiyel terapötik müdahalelerde IPEC-J2'nin yararını vurgulamaktadır.

Doku
İnce bağırsak, jejunum
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Sınıflandırma

Canlı
Domuz
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Enterosit

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
IPEC-J2 (Cytion katalog numarası 305571)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1–3 × 10⁴/cm²
Sıvı değişimi
Haftada 1 ila 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yenidoğan