Preskoči na vsebino
IPEC-J2
Tkivo
Tanko črevo, jejunum
Bolezen
Normalno
Sinonimi
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumenti

IPEC-J2

Cell line · Številka izdelka 305571

Celična linija IPEC-J2 je netransformirana, trajna epitelijska celična linija, pridobljena iz epitelija jejunuma novorojenega, nedojenega pujskega mladiča. IPEC-J2 ce...

€420.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija IPEC-J2 je netransformirana, trajna epitelijska celična linija, pridobljena iz jejunalnega epitelija novorojenega, nedojenega pujskega mladiča. Celice IPEC-J2 ohranjajo strukturne in funkcionalne značilnosti zrelih enterocitov, kar jih naredi odličen model za preučevanje črevesne fiziologije in patologije. Te celice tvorijo polarizirano monosloj z tesnimi spojmi in kažejo visoko transepitelijsko električno upornost (TEER), kar je bistveno za preučevanje funkcij epitelijske pregrade in prepustnosti. Zaradi svojega prašičjega izvora celice IPEC-J2 bolje posnemajo človeško črevesno fiziologijo v primerjavi z linijami, pridobljenimi iz glodalcev, kot sta IEC-6 in IEC-18, kar povečuje njihovo pomembnost v zoonoznih in primerjalnih raziskavah.

Funkcionalno celice IPEC-J2 izražajo ključne markerje in citokine, povezane z imunskimi odzivi, kot sta TNF-α in GM-CSF, ter imajo vrsto toll-podobnih receptorjev (TLR), ki olajšujejo raziskave interakcij med patogeni in gostiteljem. Zaradi tega so neprecenljive za mikrobiološke raziskave, zlasti pri preučevanju interakcij s patogeni, kot sta *Salmonella enterica* in patogena *Escherichia coli*. Uporabljajo se tudi za ocenjevanje učinkov probiotikov in prehranskih dopolnil na zdravje črevesja, pri čemer vključujejo oceno protivnetnih in citoprotektivnih odzivov.

Raziskave z uporabo celic IPEC-J2 so preučevale njihove odzive na oksidativni stres in njihove zaščitne mehanizme. Na primer, pokazalo se je, da eksogeni glutation (GSH) ščiti celice IPEC-J2 pred oksidativno škodo s krepitvijo mitohondrijske funkcije, izboljšanjem mitohondrijskega membranskega potenciala in zmanjšanjem kopičenja reaktivnih kisikovih spojin (ROS). Ti izsledki poudarjajo uporabnost celic IPEC-J2 pri preučevanju epitelijskih odzivov na stres in potencialnih terapevtskih posegov za ohranjanje celovitosti črevesne pregrade.

Tkivo
Tanko črevo, jejunum
Bolezen
Normalno
Sinonimi
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Razvrstitev

Organizem
Prašič
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Enterocit

04Identifikatorji

Navajanje vira
IPEC-J2 (kataloška številka Cytion 305571)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
1 do 2-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Novorojenček