Přejít na obsah
IPEC-J2
Tkáň
Tenké střevo, jejunum
Nemoc
Normální
Synonyma
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumenty

IPEC-J2

Cell line · Číslo výrobku 305571

Buněčná linie IPEC-J2 je netransformovaná, permanentní epiteliální buněčná linie odvozená z epitelu jejuna novorozeného, nekojeného selátka. IPEC-J2 ce...

€420.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie IPEC-J2 je netransformovaná, permanentní epiteliální buněčná linie odvozená z epitelu jejuna novorozeného, nekojeného selátka. Buňky IPEC-J2 si zachovávají strukturální a funkční vlastnosti zralých enterocytů, což z nich činí vynikající model pro studium fyziologie a patologie střeva. Tyto buňky tvoří polarizovanou monovrstvu s těsnými spoji a vykazují vysoký transepiteliální elektrický odpor (TEER), který je nezbytný pro zkoumání funkcí a permeability epiteliální bariéry. Díky svému prasečímu původu napodobují buňky IPEC-J2 fyziologii lidského střeva věrněji než linie odvozené od hlodavců, jako jsou IEC-6 a IEC-18, což zvyšuje jejich význam ve zoonotickém a komparativním výzkumu.

Z funkčního hlediska buňky IPEC-J2 exprimují klíčové markery a cytokiny spojené s imunitními reakcemi, jako jsou TNF-α a GM-CSF, a disponují řadou toll-like receptorů (TLR), které usnadňují studium interakcí mezi patogeny a hostitelem. Díky tomu jsou neocenitelné pro mikrobiologický výzkum, zejména při zkoumání interakcí s patogeny, jako je *Salmonella enterica* a patogenní *Escherichia coli*. Byly také využity k hodnocení účinků probiotik a doplňků stravy na zdraví střev, přičemž mezi aplikace patří i posuzování protizánětlivých a cytoprotektivních reakcí.

Výzkum s využitím buněk IPEC-J2 se zabýval jejich reakcemi na oxidační stres a jejich ochrannými mechanismy. Například bylo prokázáno, že exogenní glutathion (GSH) chrání buňky IPEC-J2 před oxidačním poškozením tím, že posiluje funkci mitochondrií, zlepšuje potenciál mitochondriální membrány a snižuje hromadění reaktivních forem kyslíku (ROS). Tyto poznatky podtrhují užitečnost buněk IPEC-J2 při studiu epiteliálních reakcí na stres a potenciálních terapeutických zásahů pro zachování integrity střevní bariéry.

Tkáň
Tenké střevo, jejunum
Nemoc
Normální
Synonyma
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Klasifikace

Organismus
Prase
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Enterocyt

04Identifikátory

Citace
IPEC-J2 (katalogové číslo Cytion 305571)
Daňové identifikační číslo NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem TrypLE Express, a to 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
1 až 2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
Novorozenci