- Væv
- Tyndtarmen, jejunum
- Sygdom
- Normal
- Synonymer
- IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2
Dokumenter
IPEC-J2
Cell line · Varenummer 305571
IPEC-J2-cellelinjen er en ikke-transformeret, permanent epitelcellelinje, der stammer fra jejunumepitelet hos en nyfødt, ikke-ammet gris. IPEC-J2-ce...
Tilpasning / Anbefalinger
- IPEC-J2Cell line€420.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
IPEC-J2-cellelinjen er en ikke-transformeret, permanent epitelcellelinje, der stammer fra jejunumepitelet hos en nyfødt, ikke-ammet gris. IPEC-J2-celler bevarer de strukturelle og funktionelle egenskaber hos modne enterocytter, hvilket gør dem til en fremragende model til undersøgelse af tarmfysiologi og -patologi. Disse celler danner et polariseret monolag med tætte samlinger og udviser høj transepithelial elektrisk modstand (TEER), hvilket er afgørende for undersøgelsen af epitelbarrierefunktioner og permeabilitet. På grund af deres svineoprindelse efterligner IPEC-J2-celler den menneskelige tarmfysiologi mere nøjagtigt sammenlignet med linjer afledt af gnavere, såsom IEC-6 og IEC-18, hvilket øger deres relevans inden for zoonotisk og komparativ forskning.
Funktionelt udtrykker IPEC-J2-celler nøglemarkører og cytokiner forbundet med immunresponser, såsom TNF-α og GM-CSF, og besidder en række toll-lignende receptorer (TLR’er), der letter undersøgelser af interaktioner mellem patogener og værter. Dette har gjort dem uvurderlige for mikrobiologisk forskning, især i forbindelse med undersøgelser af interaktioner med patogener som *Salmonella enterica* og patogen *Escherichia coli*. De er også blevet anvendt til at evaluere virkningerne af probiotika og kosttilskud på tarmhelbredet, med anvendelser der omfatter vurdering af antiinflammatoriske og cytoprotektive reaktioner.
Forskning med IPEC-J2 har undersøgt cellernes reaktioner på oxidativt stress og deres beskyttelsesmekanismer. For eksempel har det vist sig, at eksogent glutathion (GSH) beskytter IPEC-J2-celler mod oxidativ skade ved at styrke mitokondriefunktionen, forbedre mitokondriemembranpotentialet og reducere ophobningen af reaktive iltarter (ROS). Disse fund understreger nytten af IPEC-J2 i studiet af epitelcellernes stressresponser og potentielle terapeutiske interventioner til opretholdelse af tarmbarrierens integritet.
- Væv
- Tyndtarmen, jejunum
- Sygdom
- Normal
- Synonymer
- IPECJ2
- Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2
02Klassificering
- Organisme
- Gris
- Køn
- Uspecificeret
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Enterocyt
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- IPEC-J2 (Cytion-katalognummer 305571)
- NCBI-skattenummer
- 9823
- Cellosaurus
- CVCL_2246
05Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Såtæthed
- 1–3 × 10⁴/cm²
- Væskeudskiftning
- 1 til 2 gange om ugen
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
07Donor
- Donorens alder
- Nyfødt
08Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja