Gå direkte til indholdet
IPEC-J2
Væv
Tyndtarmen, jejunum
Sygdom
Normal
Synonymer
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Dokumenter

IPEC-J2

Cell line · Varenummer 305571

IPEC-J2-cellelinjen er en ikke-transformeret, permanent epitelcellelinje, der stammer fra jejunumepitelet hos en nyfødt, ikke-ammet gris. IPEC-J2-ce...

€420.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

IPEC-J2-cellelinjen er en ikke-transformeret, permanent epitelcellelinje, der stammer fra jejunumepitelet hos en nyfødt, ikke-ammet gris. IPEC-J2-celler bevarer de strukturelle og funktionelle egenskaber hos modne enterocytter, hvilket gør dem til en fremragende model til undersøgelse af tarmfysiologi og -patologi. Disse celler danner et polariseret monolag med tætte samlinger og udviser høj transepithelial elektrisk modstand (TEER), hvilket er afgørende for undersøgelsen af epitelbarrierefunktioner og permeabilitet. På grund af deres svineoprindelse efterligner IPEC-J2-celler den menneskelige tarmfysiologi mere nøjagtigt sammenlignet med linjer afledt af gnavere, såsom IEC-6 og IEC-18, hvilket øger deres relevans inden for zoonotisk og komparativ forskning.

Funktionelt udtrykker IPEC-J2-celler nøglemarkører og cytokiner forbundet med immunresponser, såsom TNF-α og GM-CSF, og besidder en række toll-lignende receptorer (TLR’er), der letter undersøgelser af interaktioner mellem patogener og værter. Dette har gjort dem uvurderlige for mikrobiologisk forskning, især i forbindelse med undersøgelser af interaktioner med patogener som *Salmonella enterica* og patogen *Escherichia coli*. De er også blevet anvendt til at evaluere virkningerne af probiotika og kosttilskud på tarmhelbredet, med anvendelser der omfatter vurdering af antiinflammatoriske og cytoprotektive reaktioner.

Forskning med IPEC-J2 har undersøgt cellernes reaktioner på oxidativt stress og deres beskyttelsesmekanismer. For eksempel har det vist sig, at eksogent glutathion (GSH) beskytter IPEC-J2-celler mod oxidativ skade ved at styrke mitokondriefunktionen, forbedre mitokondriemembranpotentialet og reducere ophobningen af reaktive iltarter (ROS). Disse fund understreger nytten af IPEC-J2 i studiet af epitelcellernes stressresponser og potentielle terapeutiske interventioner til opretholdelse af tarmbarrierens integritet.

Væv
Tyndtarmen, jejunum
Sygdom
Normal
Synonymer
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Klassificering

Organisme
Gris
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Enterocyt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
IPEC-J2 (Cytion-katalognummer 305571)
NCBI-skattenummer
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1–3 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
1 til 2 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
Nyfødt