Skip to content
IPEC-J2
Tissue
ลำไส้เล็กส่วนเจจูม
Disease
ปกติ
Synonyms
IPECJ2, Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

Documents

IPEC-J2

Cell line · Product number 305571

The IPEC-J2 cell line is a non-transformed, permanent epithelial cell line derived from the jejunal epithelium of a neonatal, unsuckled piglet. IPEC-J2 ce...

€420.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ IPEC-J2 เป็นสายเซลล์เยื่อบุผิวถาวรที่ยังไม่ถูกแปลงสภาพ ซึ่งได้มาจากเยื่อบุผิวลำไส้เล็กส่วนเจจูนของลูกหมูแรกเกิดที่ยังไม่ได้รับการดูดนม เซลล์ IPEC-J2 รักษาลักษณะทางโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์เยื่อบุลำไส้ที่เจริญเต็มที่ ทำให้เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาสรีรวิทยาและพยาธิวิทยาของลำไส้ เซลล์เหล่านี้จัดตัวเป็นชั้นเดียวที่มีขั้ว พร้อมด้วยจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junctions) และแสดงค่าความต้านทานไฟฟ้าข้ามเยื่อบุ (TEER) ที่สูง ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญในการศึกษาหน้าที่ของกำแพงกั้นเยื่อบุและความซึมผ่าน เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากหมู เซลล์ IPEC-J2 จึงจำลองสรีรวิทยาของลำไส้มนุษย์ได้ใกล้เคียงกว่าเมื่อเทียบกับสายพันธุ์ที่สกัดจากสัตว์ฟันแทะ เช่น IEC-6 และ IEC-18 ซึ่งเพิ่มความสำคัญของเซลล์เหล่านี้ในการวิจัยโรคติดต่อระหว่างสัตว์และมนุษย์ รวมถึงการวิจัยเชิงเปรียบเทียบ

ในด้านหน้าที่การทำงาน เซลล์ IPEC-J2 แสดงตัวบ่งชี้หลักและไซโตไคน์ที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน เช่น TNF-α และ GM-CSF รวมถึงมีตัวรับแบบทอลล์ (TLRs) หลากหลายชนิด ซึ่งช่วยส่งเสริมการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างเชื้อโรคกับโฮสต์ สิ่งนี้ทำให้เซลล์ IPEC-J2 มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยทางจุลชีววิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาปฏิสัมพันธ์กับเชื้อโรค เช่น *Salmonella enterica* และ *Escherichia coli* ที่ก่อโรค นอกจากนี้ยังถูกนำมาใช้เพื่อประเมินผลของโปรไบโอติกและอาหารเสริมต่อสุขภาพลำไส้ โดยมีการประยุกต์ใช้รวมถึงการประเมินการตอบสนองต้านการอักเสบและการปกป้องเซลล์

การวิจัยที่เกี่ยวข้องกับ IPEC-J2 ได้สำรวจการตอบสนองของเซลล์ต่อความเครียดออกซิเดทีฟและกลไกการป้องกันของเซลล์ ตัวอย่างเช่น ได้แสดงให้เห็นว่ากลูตาไธโอน (GSH) จากภายนอกสามารถปกป้องเซลล์ IPEC-J2 จากความเสียหายจากออกซิเดชันได้ โดยการเพิ่มประสิทธิภาพการทำงานของไมโทคอนเดรีย ปรับปรุงศักย์ไฟฟ้าของเยื่อหุ้มไมโทคอนเดรีย และลดการสะสมของอนุมูลอิสระ (ROS) ผลการศึกษาเหล่านี้เน้นย้ำถึงประโยชน์ของ IPEC-J2 ในการศึกษาการตอบสนองต่อความเครียดของเซลล์เยื่อบุผิว และวิธีการรักษาที่อาจช่วยรักษาความสมบูรณ์ของเกราะป้องกันลำไส้

Tissue
ลำไส้เล็กส่วนเจจูม
Disease
ปกติ
Synonyms
  • IPECJ2
  • Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2

02Classification

Organism
Pig
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุลำไส้

04Identifiers

Citation
IPEC-J2 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305571)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_2246

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย TrypLE Express โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (g) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1–3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
1 ถึง 2 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ทารกแรกเกิด