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Cellules KHOS-NP
Tissu
Os
Maladie
Ostéosarcome
Synonymes
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

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Cellules KHOS-NP

Cell line · Référence du produit 300235

La lignée cellulaire KHOS-NP est issue de la lignée cellulaire HOS à la suite d'une transformation par le virus du sarcome murin de Kirsten (Ki-MSV). Le processus de transformation a...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

KHOS-NP est une lignée cellulaire dérivée de la lignée cellulaire HOS par transformation avec le virus du sarcome murin de Kirsten (Ki-MSV). Le processus de transformation a donné naissance à une lignée cellulaire hautement tumorigène qui se caractérise par plusieurs propriétés distinctes, ce qui la rend précieuse pour des applications de recherche spécifiques. Les cellules KHOS-NP sont notamment particulièrement utiles pour produire des pseudotypes MSV avec divers virus de leucémie murine écotropiques et xénotropiques, ce qui présente un intérêt pour les études axées sur la réplication virale, l'oncogenèse et les voies associées.

Les cellules KHOS-NP présentent des propriétés de croissance adhérente et sont dérivées du tissu osseux d'une femme adulte de race blanche. Les cellules sont porteuses du génome Ki-MSV, mais ne produisent pas de particules virales infectieuses ni d'antigènes viraux, ce qui les rend sûres pour certaines recherches in vitro où la production de virus infectieux serait préoccupante. Malgré cela, les cellules KHOS-NP conservent une densité de saturation élevée et ont une efficacité de plaquage élevée dans l'agar mou, démontrant des caractéristiques de croissance proliférative et indépendante de l'ancrage robustes, qui sont typiques des lignées cellulaires transformées et tumorigènes.

In vivo, les cellules KHOS-NP sont hautement tumorigènes, avec une fréquence de formation de tumeurs de 100 % observée chez des souris nues dans les 21 jours suivant l'inoculation lorsqu'elles sont injectées par voie sous-cutanée avec 107 cellules. Ces propriétés font de la lignée cellulaire KHOS-NP un modèle précieux pour l'étude du développement des sarcomes, de la biologie des tumeurs et des mécanismes moléculaires sous-jacents à l'oncogenèse. Cependant, il est essentiel de noter que les cellules KHOS-NP ne sont pas adaptées à des applications thérapeutiques ou in vivo, et leur utilisation doit être limitée à des conditions expérimentales contrôlées dans un cadre de recherche.

Tissu
Os
Maladie
Ostéosarcome
Synonymes
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique
Tumorigène
Oui, sur des souris nues.

04Identifiants

Référence
KHOS-NP (numéro de catalogue Cytion 300235)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2546

05Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
13 ans
Origine ethnique
Caucasien