Mine otse sisu juurde
KHOS-NP rakud
Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

Dokumendid

KHOS-NP rakud

Cell line · Toote number 300235

KHOS-NP on rakuliin, mis on saadud HOS-rakuliinist, muutes seda Kirsteni hiire sarkoomiviirusega (Ki-MSV). Muundamisprotsess on...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KHOS-NP on rakuliin, mis on saadud HOS-rakuliinist Kirsteni hiire sarkoomiviiruse (Ki-MSV) abil transformatsiooni teel. Transformatsiooni tulemusena on saadud väga tuumorigeenne rakuliin, millel on mitmeid eristavaid omadusi, mis muudavad selle väärtuslikuks konkreetsete teadusuuringute jaoks. Eelkõige on KHOS-NP rakud eriti kasulikud MSV pseudotüüpide tootmiseks mitmesuguste ekotroopsete ja ksenotroopsete hiire leukeemia viirustega, mis on huvipakkuv viirusliku replikatsiooni, onkogeneesi ja nendega seotud protsesside uurimisel.

KHOS-NP rakud näitavad adhesiivseid kasvomadusi ja on saadud valge täiskasvanud naise luukudedest. Rakud kannavad Ki-MSV genoomi, kuid ei tooda nakkavaid viirusosakesi ega viirusantigeene, mistõttu on need ohutud teatud in vitro uurimistingimustes, kus nakkavate viiruste tootmine oleks probleemiks. Sellest hoolimata säilitavad KHOS-NP rakud kõrge küllastustiheduse ja neil on kõrge plaadistamise efektiivsus pehmes agaris, mis näitab tugevaid proliferatiivseid ja kinnitumistest sõltumatuid kasvutunnuseid, mis on tüüpilised transformatsioonilistele ja tuumorigeensetele rakuliinidele.

In vivo on KHOS-NP rakud väga tuumorigeensed, 100% tuumorite tekkimise sagedusega, mis on täheldatud alasti hiirtel 21 päeva jooksul pärast nakatumist, kui neile süstiti naha alla 107 rakku. Need omadused muudavad KHOS-NP rakuliini väärtuslikuks mudeliks sarkoomi arengu, tuumoribioloogia ja onkogeneesi molekulaarmehhanismide uurimiseks. Siiski on oluline märkida, et KHOS-NP rakud ei sobi terapeutiliseks või in vivo rakendamiseks ning nende kasutamine peaks piirduma kontrollitud eksperimentaalsete tingimustega teadusuuringute keskkonnas.

Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel.

04Tunnused

Viide
KHOS-NP (Cytioni katalooginumber 300235)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2546

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
13 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia