Langsung ke isi
Sel KHOS-NP
Tisu
Tulang
Penyakit
Osteosarkoma
Sinonim
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

Dokumen

Sel KHOS-NP

Cell line · Nomor produk 300235

KHOS-NP adalah garis sel yang berasal dari garis sel HOS melalui transformasi dengan virus sarkoma tikus Kirsten (Ki-MSV). Proses transformasi tersebut telah...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

KHOS-NP adalah garis sel yang dihasilkan dari garis sel HOS melalui transformasi dengan virus sarkoma tikus Kirsten (Ki-MSV). Proses transformasi ini telah menghasilkan garis sel yang sangat tumorigenik, yang ditandai dengan beberapa sifat unik, menjadikannya berharga untuk aplikasi penelitian spesifik. Secara khusus, sel KHOS-NP sangat berguna untuk memproduksi pseudotipe MSV dengan berbagai virus leukemia tikus ecotropic dan xenotropic, yang menarik dalam studi yang berfokus pada replikasi virus, onkogenesis, dan jalur terkait.

Sel KHOS-NP menunjukkan sifat pertumbuhan adheren dan berasal dari jaringan tulang seorang wanita dewasa berkulit putih. Sel-sel ini membawa genom Ki-MSV tetapi tidak memproduksi partikel virus menular atau antigen virus, menjadikannya aman untuk pengaturan penelitian in vitro tertentu di mana produksi virus menular menjadi perhatian. Meskipun demikian, sel KHOS-NP mempertahankan kepadatan saturasi tinggi dan efisiensi penanaman tinggi dalam agar lunak, menunjukkan karakteristik pertumbuhan proliferatif dan independen dari adhesi yang kuat, yang khas dari garis sel yang diubah dan tumorigenik.

Dalam in vivo, sel KHOS-NP sangat tumorigenik, dengan frekuensi pembentukan tumor 100% diamati pada tikus nude dalam 21 hari setelah inokulasi saat disuntikkan secara subkutan dengan 10⁷ sel. Sifat-sifat ini menjadikan garis sel KHOS-NP model yang berharga untuk mempelajari perkembangan sarkoma, biologi tumor, dan mekanisme molekuler yang mendasari onkogenesis. Namun, penting untuk dicatat bahwa sel KHOS-NP tidak cocok untuk aplikasi terapeutik atau in vivo, dan penggunaannya harus dibatasi pada kondisi eksperimental terkontrol dalam lingkungan penelitian.

Tisu
Tulang
Penyakit
Osteosarkoma
Sinonim
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti fibroblast
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang.

04Pengidentifikasi

Referensi
KHOS-NP (Nomor katalog Cytion 300235)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2546

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
2 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
13 tahun
Etnis
Kaukasia