Ga naar de inhoud
KHOS-NP Cellen
Weefsel
Bot
Ziekte
Osteosarcoom
Synoniemen
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

Documenten

KHOS-NP Cellen

Cell line · Productnummer 300235

KHOS-NP is een cellijn die is afgeleid van de HOS-cellijn door transformatie met het Kirsten-muizensarcoomvirus (Ki-MSV). Het transformatieproces heeft...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

KHOS-NP is een cellijn die is afgeleid van de HOS-cellijn door transformatie met het Kirsten-muizensarcoomvirus (Ki-MSV). Het transformatieproces heeft geresulteerd in een zeer tumorogene cellijn die wordt gekenmerkt door verschillende onderscheidende eigenschappen, waardoor deze waardevol is voor specifieke onderzoekstoepassingen. De KHOS-NP-cellen zijn met name nuttig voor de productie van MSV-pseudotypes met verschillende ecotrope en xenotrope muizenleukemievirussen, wat interessant is voor studies gericht op virale replicatie, oncogenese en gerelateerde pathways.

KHOS-NP-cellen vertonen hechtende groeieigenschappen en zijn afkomstig van het botweefsel van een blanke, volwassen vrouw. De cellen dragen het Ki-MSV-genoom, maar produceren geen infectieuze virusdeeltjes of virale antigenen, waardoor ze veilig zijn voor bepaalde in-vitroonderzoeksomgevingen waar de productie van infectieuze virussen een probleem zou kunnen vormen. Desondanks behouden de KHOS-NP-cellen een hoge verzadigingsdichtheid en hebben ze een hoge plating-efficiëntie in zachte agar, wat wijst op robuuste proliferatieve en verankering-onafhankelijke groeikenmerken, die typisch zijn voor getransformeerde en tumorige cellijnen.

In vivo zijn KHOS-NP-cellen zeer tumorigeen, met een frequentie van 100% tumorvorming bij naakte muizen binnen 21 dagen na inoculatie bij subcutane injectie met 107 cellen. Deze eigenschappen maken de KHOS-NP-cellijn tot een waardevol model voor het bestuderen van sarcoomontwikkeling, tumorbiologie en de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan oncogenese. Het is echter essentieel om op te merken dat KHOS-NP-cellen niet geschikt zijn voor therapeutische of in vivo-toepassingen en dat het gebruik ervan beperkt moet blijven tot gecontroleerde experimentele omstandigheden in een onderzoeksomgeving.

Weefsel
Bot
Ziekte
Osteosarcoom
Synoniemen
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KHOS-NP (Cytion catalogusnummer 300235)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2546

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
13 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch