Премини към съдържанието
Клетки KHOS-NP
Тъкан
Bone
Заболяване
Остеосарком
Синоними
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

Документи

Клетки KHOS-NP

Cell line · Номер на продукта 300235

KHOS-NP е клетъчна линия, получена от клетъчната линия HOS чрез трансформация с мишия саркомен вирус на Кирстен (Ki-MSV). Процесът на трансформация е...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

KHOS-NP е клетъчна линия, получена от клетъчната линия HOS чрез трансформация с мишия сарком вирус Kirsten (Ki-MSV). Процесът на трансформация е довел до получаването на силно туморогенна клетъчна линия, която се характеризира с няколко отличителни свойства, което я прави ценна за специфични изследователски приложения. KHOS-NP клетките са особено полезни за производството на MSV псевдотипове с различни екотропни и ксенотропни миши левкемични вируси, което е от интерес за изследвания, фокусирани върху вирусната репликация, онкогенезата и свързаните с тях пътища.

KHOS-NP клетките проявяват адхезивни свойства на растеж и са получени от костната тъкан на бяла възрастна жена. Клетките носят генома Ki-MSV, но не произвеждат инфекциозни вирусни частици или вирусни антигени, което ги прави безопасни за определени in vitro изследователски условия, при които производството на инфекциозни вируси би било проблем. Въпреки това, KHOS-NP клетките поддържат висока плътност на насищане и имат висока ефективност на плакиране в мек агар, демонстрирайки силни пролиферативни и независими от закрепване характеристики на растеж, които са типични за трансформирани и туморогенни клетъчни линии.

In vivo, KHOS-NP клетките са силно туморогенни, с 100% честота на туморно образуване, наблюдавана при голи мишки в рамките на 21 дни след инокулация, когато са инжектирани подкожно с 107 клетки. Тези свойства правят клетъчната линия KHOS-NP ценен модел за изучаване на развитието на саркома, туморната биология и молекулярните механизми, лежащи в основата на онкогенезата. Въпреки това, важно е да се отбележи, че KHOS-NP клетките не са подходящи за терапевтични или in vivo приложения и тяхното използване трябва да се ограничи до контролирани експериментални условия в изследователска среда.

Тъкан
Bone
Заболяване
Остеосарком
Синоними
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Туморогенен
Да, при голи мишки.

04Идентификатори

Източник
KHOS-NP (каталожен номер 300235 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_2546

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/см2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
13 години
Етническа принадлежност
Кавказки