Cellule KHOS-NP

KHOS-NP è una linea cellulare derivata dalla linea cellulare HOS attraverso la trasformazione con il virus del sarcoma murino di Kirsten (Ki-MSV). Il processo di trasformazione ha portato alla creazione di una linea cellulare altamente tumorigenica caratterizzata da diverse proprietà distintive, che la rendono preziosa per specifiche applicazioni di ricerca. In particolare, le cellule KHOS-NP sono particolarmente utili per la produzione di pseudotipi MSV con vari virus della leucemia murina ecotropici e xenotropici, che sono di interesse negli studi incentrati sulla replicazione virale, l'oncogenesi e i percorsi correlati.

Le cellule KHOS-NP mostrano proprietà di crescita aderente e sono derivate dal tessuto osseo di una donna adulta di razza bianca. Le cellule sono portatrici del genoma Ki-MSV ma non producono particelle virali infettive o antigeni virali, il che le rende sicure per determinati contesti di ricerca in vitro in cui la produzione di virus infettivi potrebbe essere motivo di preoccupazione. Ciononostante, le cellule KHOS-NP mantengono un'elevata densità di saturazione e hanno un'elevata efficienza di piastratura in agar morbido, dimostrando caratteristiche di crescita proliferativa e indipendente dall'ancoraggio, tipiche delle linee cellulari trasformate e tumorigeniche.

In vivo, le cellule KHOS-NP sono altamente tumorigeniche, con una frequenza di formazione di tumori del 100% osservata nei topi nudi entro 21 giorni dall'inoculazione quando iniettate per via sottocutanea con 10⁷ cellule. Queste proprietà rendono la linea cellulare KHOS-NP un modello prezioso per lo studio dello sviluppo del sarcoma, della biologia dei tumori e dei meccanismi molecolari alla base dell'oncogenesi. Tuttavia, è essenziale notare che le cellule KHOS-NP non sono adatte per applicazioni terapeutiche o in vivo e il loro uso dovrebbe essere limitato a condizioni sperimentali controllate in un contesto di ricerca.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia