.jpg)
- Doku
- Kemik
- Hastalık
- Osteosarkom
- Eş anlamlılar
- KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS
Belgeler
KHOS-NP Hücreleri
Cell line · Ürün numarası 300235
KHOS-NP, HOS hücre hattının Kirsten fare sarkom virüsü (Ki-MSV) ile transformasyonu yoluyla elde edilen bir hücre hattıdır. Transformasyon süreci...
Kişiselleştirme / Öneriler
- KHOS-NP HücreleriCell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
KHOS-NP, Kirsten fare sarkom virüsü (Ki-MSV) ile transformasyon yoluyla HOS hücre hattından türetilen bir hücre hattıdır. Transformasyon süreci, birkaç farklı özellik ile karakterize edilen ve belirli araştırma uygulamaları için değerli olan, yüksek tümörijenik bir hücre hattı ile sonuçlanmıştır. Özellikle, KHOS-NP hücreleri, viral replikasyon, onkogenez ve ilgili yolaklara odaklanan çalışmalarda ilgi konusu olan çeşitli ekotropik ve ksenotropik fare lösemi virüsleri ile MSV psödotiplerinin üretilmesinde özellikle yararlıdır.
KHOS-NP hücreleri, yapışkan büyüme özellikleri sergiler ve beyaz, yetişkin bir kadının kemik dokusundan türetilmiştir. Hücreler Ki-MSV genomunu taşır, ancak bulaşıcı virüs partikülleri veya viral antijenler üretmez, bu da onları bulaşıcı viral üretimin sorun olabileceği belirli in vitro araştırma ortamları için güvenli hale getirir. Buna rağmen, KHOS-NP hücreleri yüksek bir doygunluk yoğunluğunu korur ve yumuşak agar içinde yüksek bir plaklama verimliliğine sahiptir, bu da dönüştürülmüş ve tümörojenik hücre hatları için tipik olan güçlü proliferatif ve ankrajdan bağımsız büyüme özelliklerini gösterir.
In vivo olarak, KHOS-NP hücreleri oldukça tümörojeniktir ve 107 hücre subkutan enjeksiyonu ile aşılama sonrası 21 gün içinde çıplak farelerde %100 tümör oluşumu sıklığı gözlemlenmiştir. Bu özellikleri, KHOS-NP hücre hattını sarkom gelişimi, tümör biyolojisi ve onkogenezin altında yatan moleküler mekanizmaları incelemek için değerli bir model haline getirmektedir. Ancak, KHOS-NP hücrelerinin terapötik veya in vivo uygulamalar için uygun olmadığını ve kullanımlarının araştırma ortamında kontrollü deney koşullarıyla sınırlandırılması gerektiğini belirtmek önemlidir.
- Doku
- Kemik
- Hastalık
- Osteosarkom
- Eş anlamlılar
- KHOS/NP
- KHOS NP
- KHOSNP
- R-970-5
- KHOS
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Kadın
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Fibroblast benzeri
- Tümör oluşturucu
- Evet, çıplak farelerde.
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- KHOS-NP (Cytion katalog numarası 300235)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2546
05İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Ekim yoğunluğu
- 2 x 104 hücre/cm2
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
07Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- 13 yıl
- Etnik köken
- Kafkas
08Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet