Pāriet uz saturu
KHOS-NP šūnas
Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

Dokumenti

KHOS-NP šūnas

Cell line · Preces numurs 300235

KHOS-NP ir šūnu līnija, kas iegūta no HOS šūnu līnijas, to transformējot ar Kirsten peles sarkomas vīrusu (Ki-MSV). Transformācijas process ir...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KHOS-NP ir šūnu līnija, kas iegūta no HOS šūnu līnijas, transformējot to ar Kirsten peles sarkomas vīrusu (Ki-MSV). Transformācijas procesa rezultātā ir iegūta ļoti tumorogēna šūnu līnija, kurai ir vairākas atšķirīgas īpašības, kas to padara vērtīgu konkrētiem pētniecības mērķiem. Jo īpaši KHOS-NP šūnas ir noderīgas MSV pseidotipu ražošanai ar dažādiem ekotropiskiem un ksenotropiskiem peles leikēmijas vīrusiem, kas ir interesanti pētījumos, kuri vērsti uz vīrusu replikāciju, onkogēnēzi un saistītiem procesiem.

KHOS-NP šūnas uzrāda adhezīvas augšanas īpašības un ir iegūtas no balta, pieaugušas sievietes kaulu audiem. Šūnas nes Ki-MSV genomu, bet neražo infekciozas vīrusu daļiņas vai vīrusu antigēnus, tādējādi padarot tās drošas noteiktos in vitro pētījumu apstākļos, kur infekciozas vīrusu ražošana varētu būt problēma. Neskatoties uz to, KHOS-NP šūnas saglabā augstu piesātinājuma blīvumu un ir augsta plākšņu efektivitāte mīkstā agārā, demonstrējot spēcīgas proliferatīvas un no stiprinājumiem neatkarīgas augšanas īpašības, kas ir tipiskas transformētām un tumorogēnām šūnu līnijām.

In vivo KHOS-NP šūnas ir ļoti tumorogēnas, ar 100 % audzēju veidošanās biežumu, kas novērots kailām pelēm 21 dienu laikā pēc inokulācijas, kad tām subkutāni injicē 107 šūnas. Šīs īpašības padara KHOS-NP šūnu līniju par vērtīgu modeli sarkomas attīstības, audzēju bioloģijas un onkogēzes molekulāro mehānismu pētīšanai. Tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka KHOS-NP šūnas nav piemērotas terapeitiskai vai in vivo lietošanai, un to lietošana jāierobežo ar kontrolētiem eksperimentāliem apstākļiem pētniecības vidē.

Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm.

04Identifikatori

Atsauce
KHOS-NP (Cytion kataloga numurs 300235)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2546

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
13 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis