Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα KHOS-NP
Ιστός
Οστά
Ασθένεια
Οστεοσάρκωμα
Συνώνυμα
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

Έγγραφα

Κύτταρα KHOS-NP

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300235

Η KHOS-NP είναι μια κυτταρική σειρά που προέρχεται από την κυτταρική σειρά HOS μέσω μετασχηματισμού με τον ιό του ποντικού σαρκώματος Kirsten (Ki-MSV). Η διαδικασία του μετασχηματισμού έχει...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το KHOS-NP είναι μια κυτταρική σειρά που προέρχεται από την κυτταρική σειρά HOS μέσω μετασχηματισμού με τον ιό Kirsten murine sarcoma virus (Ki-MSV). Η διαδικασία μετασχηματισμού έχει οδηγήσει σε μια κυτταρική σειρά με υψηλή ογκογένεση, η οποία χαρακτηρίζεται από διάφορες διακριτές ιδιότητες, καθιστώντας την πολύτιμη για συγκεκριμένες ερευνητικές εφαρμογές. Συγκεκριμένα, τα κύτταρα KHOS-NP είναι ιδιαίτερα χρήσιμα για την παραγωγή ψευδοτύπων MSV με διάφορους εκτροπικούς και ξενοτροπικούς ιούς λευχαιμίας ποντικού, κάτι που παρουσιάζει ενδιαφέρον σε μελέτες που εστιάζουν στην ιική αναπαραγωγή, την ογκογένεση και τις σχετικές οδούς.

Τα κύτταρα KHOS-NP εμφανίζουν ιδιότητες προσκολλητικής ανάπτυξης και προέρχονται από τον οστικό ιστό μιας λευκής, ενήλικης γυναίκας. Τα κύτταρα φέρουν το γονιδίωμα Ki-MSV, αλλά δεν παράγουν μολυσματικά ιικά σωματίδια ή ιικά αντιγόνα, γεγονός που τα καθιστά ασφαλή για ορισμένες συνθήκες έρευνας in vitro όπου η παραγωγή μολυσματικών ιών θα αποτελούσε πρόβλημα. Παρ' όλα αυτά, τα κύτταρα KHOS-NP διατηρούν υψηλή πυκνότητα κορεσμού και έχουν υψηλή απόδοση επιχρίσματος σε μαλακό άγαρ, επιδεικνύοντας ισχυρά χαρακτηριστικά πολλαπλασιαστικής και ανεξάρτητης από την πρόσφυση ανάπτυξης, τα οποία είναι τυπικά των μετασχηματισμένων και ογκογόνων κυτταρικών σειρών.

In vivo, τα κύτταρα KHOS-NP είναι εξαιρετικά ογκογόνα, με συχνότητα σχηματισμού όγκων 100% που παρατηρήθηκε σε γυμνά ποντίκια εντός 21 ημερών μετά την εμβολιασμό, όταν εγχύθηκαν υποδόρια 107 κύτταρα. Αυτές οι ιδιότητες καθιστούν τη κυτταρική σειρά KHOS-NP ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της ανάπτυξης σαρκώματος, της βιολογίας των όγκων και των μοριακών μηχανισμών που υποκείμεθα στην ογκογένεση. Ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι τα κύτταρα KHOS-NP δεν είναι κατάλληλα για θεραπευτικές ή in vivo εφαρμογές και η χρήση τους πρέπει να περιορίζεται σε ελεγχόμενες πειραματικές συνθήκες σε ερευνητικό περιβάλλον.

Ιστός
Οστά
Ασθένεια
Οστεοσάρκωμα
Συνώνυμα
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια.

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
KHOS-NP (αριθμός καταλόγου Cytion 300235)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_2546

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
2 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
13 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος