Clone L5178Y TK+/- (3.7.2C)

La lignée cellulaire L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C est un modèle de lymphome murin largement utilisé pour les tests de génotoxicité in vitro, en particulier dans le test de mutation du gène de la thymidine kinase (TK) du lymphome murin (MLA). Ce clone est dérivé de la lignée cellulaire parentale L5178Y, établie à partir d'un lymphome thymique induit par le méthylcholanthrène chez des souris DBA-2. Le sous-clone 3.7.2C a été spécialement développé pour être hétérozygote au locus TK (TK+/−), ce qui permet la sélection de mutants TK−/− par des événements de perte d'hétérozygotie.

Les cellules L5178Y TK+/− 3.7.2C se caractérisent par leur temps de doublement rapide (environ 8 à 11 heures) et leur nombre chromosomique modal stable de 40. Elles présentent un caryotype complexe comprenant des fusions robertsoniennes et des translocations spécifiques. Le gène p53 est muté dans ces cellules, un allèle portant une mutation non-sens dans l'exon 4 et l'autre une mutation faux-sens dans l'exon 5, ce qui entraîne la perte de la fonction normale du p53. Ce contexte génétique renforce leur utilité pour l'étude des effets clastogènes et mutagènes.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie