الانتقال إلى المحتوى
نسخة L5178Y TK+/- (3.7.2C)
الأنسجة
الغدة الصعترية
المرض
سرطان الغدة الصعترية في الفئران
المرادفات
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

المستندات

نسخة L5178Y TK+/- (3.7.2C)

Cell line · رقم المنتج 305485

يُعد خط الخلايا L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C نموذجًا لسرطان الغدد الليمفاوية لدى الفئران يُستخدم على نطاق واسع في اختبارات السمية الجينية المختبرية، ولا سيما في اختبار ثيميد سرطان الغدد الليمفاوية لدى الفئران...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C هي نموذج لليمفوما الفئران يستخدم على نطاق واسع في اختبارات السمية الجينية في المختبر، ولا سيما في اختبار طفرة جين ثيميدين كيناز (TK) لليمفوما الفئران (MLA). وقد استُمد هذا النسخة من سلسلة الخلايا الأصلية L5178Y، التي تم إنشاؤها من ليمفوما الغدة الصعترية التي يسببها الميثيل كولانثرين في فئران DBA-2. تم تطوير النسخة الفرعية 3.7.2C خصيصًا لتكون متغايرة في موقع TK (TK+/−)، مما يتيح اختيار متحولات TK−/− من خلال أحداث فقدان التغاير.

تتميز خلايا L5178Y TK+/− 3.7.2C بسرعة تضاعف عددها (حوالي 8-11 ساعة) واستقرار عدد الكروموسومات النموذجي عند 40. وهي تظهر نمطًا كروموسوميًا معقدًا يشمل اندماجات روبرتسونية وانتقالات محددة. يتحور الجين p53 في هذه الخلايا، حيث يحمل أحد الأليلات طفرة غير منطقية في الإكسون 4 والآخر طفرة خاطئة في الإكسون 5، مما يؤدي إلى فقدان وظيفة p53 الطبيعية. تعزز هذه الخلفية الجينية فائدتها في دراسة التأثيرات الكلاستوجينية والمطفرة.

الأنسجة
الغدة الصعترية
المرض
سرطان الغدة الصعترية في الفئران
المرادفات
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا اللمفاوية الشبيهة بالأرومة اللمفاوية
نوع الخلية
الخلية التائية

04المعرّفات

المرجع
L5178Y TK+/- Clone (3.7.2C) (رقم كتالوج Cytion 305485)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_6665

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 10٪ من مصل الأجنة البشري (FBS) و0,1٪ من مادة Pluronic F-68
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
0,1-2 × 10⁶ خلية/مل
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
تخفيف فوري في 25 مل من وسط الاستزراع (المعيار: 8 مل)
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسط للحفظ بالتبريد، نستخدم مزيجًا مكونًا من 95٪ (حجم/حجم) من مصل الدم البشري (FBS) + 5٪ (حجم/حجم) من ثنائي ميثيل سلفونيك أوكسيد (DMSO) + 0,1٪ من مادة Pluronic F-68 لضمان قابلية البقاء على قيد الحياة بعد الذوبان، أو نستخدم CM-1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 800100)، الذي يحتوي على مواد واقية من التناضح ومثبتات استقلابية مُحسَّنة لتعزيز معدل الاسترداد وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
د.ب.أ/2
عمر المتبرع
8 أشهر