Preskoči na vsebino
Klon L5178Y TK+/- (3.7.2C)
Tkivo
Thymus
Bolezen
Limfom mišjega timusa
Sinonimi
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

Dokumenti

Klon L5178Y TK+/- (3.7.2C)

Cell line · Številka izdelka 305485

Celična linija L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C je mišji limfomski model, ki se pogosto uporablja za preskuse genotoksičnosti in vitro, zlasti v mišjem limfomskem timid...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C je model mišjega limfoma, ki se pogosto uporablja za testiranje genotoksičnosti in vitro, zlasti v testu mutacije gena timidin kinaze (TK) mišjega limfoma (MLA). Ta klon je bil pridobljen iz starševske celične linije L5178Y, vzpostavljene iz timusnega limfoma, povzročenega z metilkolantrenom pri miših DBA-2. Podklon 3.7.2C je bil posebej razvit, da je heterozigoten na lokusu TK (TK+/−), kar omogoča izbiro mutantov TK−/− prek izgube heterozigotnosti.

Celice L5178Y TK+/− 3.7.2C so značilne po hitrem podvajanju populacije (približno 8–11 ur) in stabilnem modalnem številu kromosomov 40. Imajo kompleksen kariotip, vključno z robertsonskimi fuzijami in specifičnimi translokacijami. Gen p53 je v teh celicah mutiran, pri čemer en alel nosi nesmiselno mutacijo v eksonu 4, drugi pa zmotno mutacijo v eksonu 5, kar povzroči izgubo normalne funkcije p53. To genetsko ozadje povečuje njihovo uporabnost za preučevanje klastogenih in mutagenih učinkov.

Tkivo
Thymus
Bolezen
Limfom mišjega timusa
Sinonimi
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblastom podobni
Vrsta celice
Celice T

04Identifikatorji

Navajanje vira
L5178Y TK+/- klon (3.7.2C) (številka kataloga Cytion 305485)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Mediju dodajte 10 % FBS in 0,1 % Pluronic F-68
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Gostota setve
0,1–2 × 10⁶ celic/ml
Obnova tekočine
2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Takojšnje razredčenje v 25 ml gojišča (standard: 8 ml)
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot sredstvo za krioprezervacijo uporabljamo 95 % (v/v) FBS + 5 % (v/v) DMSO + 0,1 % Pluronic F-68 za ustrezno preživetje celic po odmrzovanju ali pa CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmozaščitne snovi in metabolne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje kriogeno povzročenega stresa.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
DBA/2
Starost darovalca
8 mesecev