Pereiti prie turinio
L5178Y TK+/- klonas (3.7.2C)
Audinys
Užkrūčio liauka
Liga
Pelės užkrūčio limfoma
Sinonimai
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

Dokumentai

L5178Y TK+/- klonas (3.7.2C)

Cell line · Prekės numeris 305485

L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C ląstelių linija yra pelių limfomos modelis, plačiai naudojamas genotoksiškumo tyrimams in vitro, ypač pelių limfomos timidino...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

L5178Y TK+/− klonas 3.7.2C ląstelių linija yra pelės limfomos modelis, plačiai naudojamas in vitro genotoksiškumo tyrimams, ypač pelės limfomos timidino kinazės (TK) geno mutacijų tyrimui (MLA). Šis klonas buvo gautas iš tėvinės L5178Y ląstelių linijos, sukurta iš DBA-2 pelių metilcholantrenu sukeltos limfomos. 3.7.2C subklonas buvo specialiai sukurtas, kad būtų heterozigotinis TK lokuse (TK+/−), leidžiant atrinkti TK−/− mutantus per heterozigotijos praradimo įvykius.

L5178Y TK+/− 3.7.2C ląstelės pasižymi greitu populiacijos padvigubėjimo laiku (maždaug 8–11 valandų) ir stabiliu modaliniu chromosomų skaičiumi – 40. Jos pasižymi sudėtingu kariotipu, įskaitant Robertsono jungtis ir specifines translokacijas. Šiose ląstelėse mutavęs p53 genas, kurio vienas alelis turi nonsenso mutaciją eksone 4, o kitas – missenso mutaciją eksone 5, dėl to prarandama normali p53 funkcija. Šis genetinis fonas padidina jų naudingumą tirti klastogeninius ir mutageninius poveikius.

Audinys
Užkrūčio liauka
Liga
Pelės užkrūčio limfoma
Sinonimai
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus
Ląstelių tipas
T ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
L5178Y TK+/- klonas (3.7.2C) (Cytion katalogo numeris 305485)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Pridėkite į terpę 10 % FBS ir 0,1 % Pluronic F-68
Subkultūrinis auginimas
Surinkite ląstelių suspensiją į 15 ml mėgintuvėlį ir švelniai nuplaukite prilipusias ląsteles PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio (naudokite 3-5 ml T25 kolboms ir 5-10 ml T75 kolboms). Užtepkite "Accutase" (1-2 ml T25 kolboms, 2,5 ml T75 kolboms), kad visiškai padengtumėte ląstelių sluoksnį. Leiskite ląstelėms 10 minučių inkubuotis kambario temperatūroje. Po inkubacijos sumaišykite ir centrifuguokite suspensiją ir prilipusias ląsteles. Po centrifugavimo atsargiai resuspenduokite ląstelių granules ir perkelkite ląstelių suspensiją į naujas kolbas su šviežia terpe.
Sėjos tankis
0,1–2 × 10⁶ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Iš karto praskiesti 25 ml auginimo terpės (standartas: 8 ml)
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 95 % (tūrio) FBS + 5 % (tūrio) DMSO + 0,1 % Pluronic F-68, siekdami užtikrinti pakankamą gyvybingumą po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurio sudėtyje yra optimizuoti osmoapsauginiai ir metabolizmo stabilizatoriai, skirti pagerinti atsigavimą ir sumažinti kriokonservavimo sukeltą stresą.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
DBA/2
Donoro amžius
8 mėnesiai