L5178Y TK+/- kloon (3.7.2C)

De L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C-cellijn is een muizenlymfoommodel dat veel wordt gebruikt voor in-vitro-genotoxiciteitstesten, met name in de muizenlymfoom-thymidinekinase (TK)-genmutatietest (MLA). Deze kloon is afgeleid van de oorspronkelijke L5178Y-cellijn, die is ontwikkeld op basis van een thymuslymfoom dat is geïnduceerd door methylcholantreen in DBA-2-muizen. De 3.7.2C-subkloon is specifiek ontwikkeld om heterozygoot te zijn op de TK-locus (TK+/−), waardoor TK−/−-mutanten kunnen worden geselecteerd door middel van verlies van heterozygositeit.

L5178Y TK+/− 3.7.2C-cellen worden gekenmerkt door hun snelle populatieverdubbelingstijd (ongeveer 8-11 uur) en stabiel modaal chromosoomaantal van 40. Ze vertonen een complex karyotype, waaronder Robertson-fusies en specifieke translocaties. Het p53-gen is gemuteerd in deze cellen, waarbij één allel een nonsense-mutatie in exon 4 draagt en het andere een missense-mutatie in exon 5, wat resulteert in het verlies van de normale p53-functie. Deze genetische achtergrond vergroot hun bruikbaarheid voor het bestuderen van clastogene en mutagene effecten.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring