Κλώνος L5178Y TK+/- (3.7.2C)

Η κυτταρική σειρά L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C είναι ένα μοντέλο λεμφώματος ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως για δοκιμές γονιδιακής τοξικότητας in vitro, ιδιαίτερα στη δοκιμή γονιδιακής μετάλλαξης της θυμιδίνης κινάσης (TK) σε λέμφωμα ποντικού (MLA). Αυτός ο κλώνος προήλθε από τη γονική κυτταρική σειρά L5178Y, η οποία δημιουργήθηκε από λέμφωμα θύμου αδένα που προκλήθηκε από μεθυλοχολανθρένιο σε ποντίκια DBA-2. Ο υποκλώνος 3.7.2C αναπτύχθηκε ειδικά για να είναι ετερόζυγος στον τόπο TK (TK+/−), επιτρέποντας την επιλογή των μεταλλαγμένων TK−/− μέσω συμβάντων απώλειας ετερόζυγης.

Τα κύτταρα L5178Y TK+/− 3.7.2C χαρακτηρίζονται από τον γρήγορο χρόνο διπλασιασμού του πληθυσμού τους (περίπου 8-11 ώρες) και τον σταθερό αριθμό χρωμοσωμάτων 40. Παρουσιάζουν έναν σύνθετο καρυότυπο που περιλαμβάνει συγχωνεύσεις Robertsonian και συγκεκριμένες μετατοπίσεις. Το γονίδιο p53 είναι μεταλλαγμένο σε αυτά τα κύτταρα, με το ένα αλληλόμορφο να φέρει μια μεταλλαγή χωρίς νόημα στο εξόνιο 4 και το άλλο μια μεταλλαγή με νόημα στο εξόνιο 5, με αποτέλεσμα την απώλεια της φυσιολογικής λειτουργίας του p53. Αυτό το γενετικό υπόβαθρο ενισχύει τη χρησιμότητά τους για τη μελέτη κλαστογόνων και μεταλλαξιογόνων επιδράσεων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης