Tartalomra ugrás
L5178Y TK+/- klón (3.7.2C)
Szövet
Thymus
Betegség
Egér csecsemőmirigy-limfóma
Szinonimák
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

Dokumentumok

L5178Y TK+/- klón (3.7.2C)

Cell line · Termékszám 305485

Az L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C sejtvonal egy egérlimfóma-modell, amelyet széles körben alkalmaznak in vitro genotoxicitási vizsgálatokhoz, különösen az egérlimfóma-timid...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C sejtvonal egy egér limfóma modell, amelyet széles körben használnak in vitro genotoxicitási vizsgálatokhoz, különösen az egér limfóma timidin-kináz (TK) génmutációs vizsgálatában (MLA). Ez a klón az L5178Y szülői sejtvonalból származik, amelyet DBA-2 egerekben metilkolantrénnel indukált timuslimfómából hoztak létre. A 3.7.2C szubklónt kifejezetten úgy fejlesztették ki, hogy heterozigóta legyen a TK lókuszban (TK+/−), lehetővé téve a TK−/− mutánsok kiválasztását a heterozigóta elvesztése révén.

Az L5178Y TK+/− 3.7.2C sejtek gyors populációduplázódási idővel (kb. 8-11 óra) és stabil 40-es kromoszómaszámmal jellemezhetők. Komplex kariotípust mutatnak, beleértve a Robertson-féle fúziókat és specifikus transzlokációkat. A p53 gén mutálódott ezekben a sejtekben, az egyik allél az exon 4-ben nonszensz mutációt, a másik pedig az exon 5-ben missense mutációt hordoz, ami a normális p53 funkció elvesztését eredményezi. Ez a genetikai háttér növeli hasznosságukat a klastogén és mutagén hatások tanulmányozásában.

Szövet
Thymus
Betegség
Egér csecsemőmirigy-limfóma
Szinonimák
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblaszt-szerű
Sejttípus
T-sejt

04Azonosítók

Hivatkozás
L5178Y TK+/- klón (3.7.2C) (Cytion katalógusszám: 305485)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-sel és 0,1% Pluronic F-68-cal
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Ültetési sűrűség
0,1–2 × 10⁶ sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Azonnali hígítás 25 ml tenyésztőközegbe (szabvány: 8 ml)
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezervációs táptalajként 95% (v/v) FBS + 5% (v/v) DMSO + 0,1% Pluronic F-68 keveréket használunk a felolvasztás utáni megfelelő életképesség biztosítása érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a sejtek helyreállásának elősegítése és a kriogenikus stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
DBA/2
Az adományozó életkora
8 hónap