 WAKO P1 10X01 070126_Overlay.jpg)
- Kudos
- Thymus
- Sairaus
- Hiiren kateenkorvan lymfooma
- Synonyymit
- L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)
Asiakirjat
L5178Y TK+/- -klooni (3.7.2C)
Cell line · Tuotenumero 305485
L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C -solulinja on hiiren lymfoomamalli, jota käytetään laajalti in vitro -genotoksisuustestauksessa, erityisesti hiiren lymfooman tymidiini...
Räätälöinti / Suositukset
- L5178Y TK+/- -klooni (3.7.2C)Cell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
L5178Y TK+/− klooni 3.7.2C -solulinja on hiiren lymfoomamalli, jota käytetään laajalti in vitro -genotoksisuustestauksessa, erityisesti hiiren lymfooman tymidiinikinaasi (TK) -geenin mutaatiotestissä (MLA). Tämä klooni on peräisin vanhemmasta L5178Y-solulinjasta, joka on perustettu DBA-2-hiirissä metyylikolantreenilla indusoidusta kateenkorvan lymfoomasta. 3.7.2C-alaklooni kehitettiin erityisesti heterotsygoottiseksi TK-lokuksessa (TK+/−), mikä mahdollistaa TK−/−-mutanttien valinnan heterotsygoottisuuden menetyksen kautta.
L5178Y TK+/− 3.7.2C -soluille on ominaista nopea populaation kaksinkertaistumisaika (noin 8–11 tuntia) ja vakaa modaalinen kromosomiluku 40. Niillä on monimutkainen karyotyyppi, joka sisältää Robertsonin fuusioita ja spesifisiä translokaatioita. P53-geeni on mutatoitunut näissä soluissa, ja toisessa alleelissa on nonsense-mutaatio eksonissa 4 ja toisessa missense-mutaatio eksonissa 5, mikä johtaa normaalin p53-toiminnon menetykseen. Tämä geneettinen tausta parantaa niiden käyttökelpoisuutta klastogeenisten ja mutageenisten vaikutusten tutkimuksessa.
- Kudos
- Thymus
- Sairaus
- Hiiren kateenkorvan lymfooma
- Synonyymit
- L5178Y TK+/-3.7.2c
- TK+/- (clone 3.7.2C)
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Jousitus
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Lymfoblastien kaltaiset
- Solutyyppi
- T-solu
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- L5178Y TK+/- klooni (3.7.2C) (Cytion-tuotenumero 305485)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_6665
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Lisää elatusaineeseen 10 % FBS:ää ja 0,1 % Pluronic F-68:aa
- Soluviljely
- Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 0,1–2 × 10⁶ solua/ml
- Nesteen uusiminen
- 2 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Laimennetaan välittömästi 25 ml:aan viljelyliuosta (vakio: 8 ml)
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysliuoksena käytämme 95 % (v/v) FBS:ää + 5 % (v/v) DMSO:ta + 0,1 % Pluronic F-68:aa, jotta solujen elinkelpoisuus sulatuksen jälkeen olisi riittävä, tai CM-1:tä (Cytion-tuotenumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoottisia suoja-aineita ja aineenvaihdunnan stabilisaattoreita elpymisen tehostamiseksi ja kryosäilytyksestä johtuvan stressin vähentämiseksi.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- DBA/2
- Luovuttajan ikä
- 8 kuukautta
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä