Mine otse sisu juurde
L5178Y TK+/- kloon (3.7.2C)
Kude
Thymus
Haigus
Hiire tüümuse lümfoom
Sünonüümid
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

Dokumendid

L5178Y TK+/- kloon (3.7.2C)

Cell line · Toote number 305485

Rakuliin L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C on hiire lümfoomi mudel, mida kasutatakse laialdaselt in vitro genotoksilisuse katsetamiseks, eriti hiire lümfoomi timidiini...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

L5178Y TK+/− kloon 3.7.2C rakuliin on hiire lümfoomi mudel, mida kasutatakse laialdaselt in vitro genotoksilisuse testimiseks, eriti hiire lümfoomi tümiidinkinaasi (TK) geeni mutatsiooni analüüsis (MLA). See kloon on saadud vanemast L5178Y rakuliinist, mis on loodud DBA-2 hiirtel metüülkolantreeni poolt indutseeritud tüümuse lümfoomist. 3.7.2C subkloon arendati spetsiaalselt TK-lokusel heterosügootseks (TK+/−), võimaldades TK−/− mutatsioonide valikut heterosügootsuse kaotuse kaudu.

L5178Y TK+/− 3.7.2C rakke iseloomustab kiire populatsiooni kahekordistumisaeg (umbes 8–11 tundi) ja stabiilne modaalne kromosoomide arv 40. Neil on keeruline kariotüüp, mis hõlmab Robertsoni fusioone ja spetsiifilisi translokatsioone. Nendes rakkudes on p53 geen mutatsiooniga, kus üks alleel kannab eksonis 4 nonsenssmutatsiooni ja teine eksonis 5 missenssmutatsiooni, mille tulemusena kaob normaalne p53 funktsioon. See geneetiline taust suurendab nende kasulikkust klastogeensete ja mutageensete mõjude uurimisel.

Kude
Thymus
Haigus
Hiire tüümuse lümfoom
Sünonüümid
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastilaadsed
Rakutüüp
T-rakk

04Tunnused

Viide
L5178Y TK+/- kloon (3.7.2C) (Cytioni katalooginumber 305485)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 10% FBS-i ja 0,1% Pluronic F-68-t
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
0,1–2 × 10⁶ rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Lahjendamine kohe 25 ml kasvukeskkonnas (standard: 8 ml)
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimise keskkonnana kasutame 95% (v/v) FBS + 5% (v/v) DMSO + 0,1% Pluronic F-68, et tagada piisav eluvõime pärast sulatamist, või CM-1 (Cytion katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmootilisi kaitsjaid ja ainevahetuse stabilisaatoreid, et parandada rakkude taastumist ja vähendada krüokonserveerimisest tingitud stressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
DBA/2
Doonori vanus
8 kuud