コンテンツへスキップ
L5178Y TK+/- クローン (3.7.2C)
ティッシュ
胸腺
病気
マウス胸腺リンパ腫
同義語
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

L5178Y TK+/- クローン (3.7.2C)

Cell line · 製品番号 305485

L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C 細胞株は、in vitro 遺伝毒性試験、特にマウスリンパ腫チミジン...において広く使用されているマウスリンパ腫モデルである。

€550.00税・送料別
在庫あり
ロット
おすすめ(最も新しいロット)
  • CoA
1

01概要

説明

L5178Y TK+/− クローン3.7.2C細胞株は、特にマウスリンパ腫チミジンキナーゼ(TK)遺伝子変異アッセイ(MLA)において、in vitro遺伝毒性試験に広く用いられるマウスリンパ腫モデルである。このクローンは、DBA-2マウスにおいてメチルコラントレンによって誘導された胸腺リンパ腫から樹立された親株L5178Y細胞株に由来する。 3.7.2Cサブクローンは、TK遺伝子座においてヘテロ接合体(TK+/−)となるよう特異的に開発され、ヘテロ接合性喪失イベントを通じてTK−/−変異体の選択を可能にしている。

L5178Y TK+/− 3.7.2C 細胞は、その迅速な集団倍加時間(約 8~11 時間)と 40 の安定したモード染色体数によって特徴づけられます。これらの細胞は、ロバートソン融合および特定の転座を含む複雑な核型を示します。 これらの細胞では p53 遺伝子が変異しており、一方の対立遺伝子はエクソン 4 にナンセンス変異、もう一方の対立遺伝子はエクソン 5 にミスセンス変異を有しており、その結果、正常な p53 機能が失われています。この遺伝的背景により、この細胞は、染色体異常誘発性および変異原性の研究に有用です。

ティッシュ
胸腺
病気
マウス胸腺リンパ腫
同義語
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02分類

生物
マウス
セックス
女性
成長特性
サスペンション
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
リンパ芽球様
細胞の種類
T細胞

04識別子

引用
L5178Y TK+/- クローン (3.7.2C) (Cytion カタログ番号 305485)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_6665

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10%のFBSと0.1%のプルロニックF-68を添加する
継代培養
浮遊細胞を15 mlチューブに集め、カルシウムとマグネシウムを欠いたPBSで付着細胞を穏やかに洗浄する(T25フラスコでは3~5 ml、T75フラスコでは5~10 mlを使用)。アキュターゼ(T25フラスコでは1-2 ml、T75フラスコでは2.5 ml)を、細胞層を完全に覆うように塗布する。細胞を室温で10分間インキュベートする。インキュベーション後、懸濁液と接着細胞の両方を合わせて遠心する。遠心後、細胞ペレットを注意深く懸濁し、細胞懸濁液を新しい培地の入った新しいフラスコに移す。
播種密度
0.1~2×10⁶細胞/mL
流体の更新
週2回
解凍後の回復
直ちに25mlの培地へ希釈する(標準:8ml)
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存液としては、解凍後の生存率を確保するために、95%(v/v)FBS + 5%(v/v)DMSO + 0.1% プルロニックF-68を使用しています。あるいは、回復率を高め、凍結によるストレスを軽減するために、最適化された浸透圧保護剤および代謝安定化剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用しています。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

品種/亜種
DBA/2
ドナーの年齢
8ヶ月