İçeriğe atla
L5178Y TK+/- Klonu (3.7.2C)
Doku
Timüs
Hastalık
Fare timik lenfoma
Eş anlamlılar
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

L5178Y TK+/- Klonu (3.7.2C)

Cell line · Ürün numarası 305485

L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C hücre hattı, özellikle fare lenfoma timid... üzerinde yapılan in vitro genotoksisite testlerinde yaygın olarak kullanılan bir fare lenfoma modelidir.

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

L5178Y TK+/− Klon 3.7.2C hücre hattı, özellikle fare lenfoma timidin kinaz (TK) gen mutasyonu testinde (MLA) in vitro genotoksisite testleri için yaygın olarak kullanılan bir fare lenfoma modelidir. Bu klon, DBA-2 farelerinde metilkolantren ile indüklenen timik lenfomadan oluşturulan ebeveyn L5178Y hücre hattından türetilmiştir. 3.7.2C alt klonu, TK lokusunda (TK+/−) heterozigot olacak şekilde özel olarak geliştirilmiştir ve heterozigotluk kaybı olayları yoluyla TK−/− mutantlarının seçilmesini mümkün kılar.

L5178Y TK+/− 3.7.2C hücreleri, hızlı popülasyon ikiye katlanma süresi (yaklaşık 8-11 saat) ve 40 olan stabil modal kromozom sayısı ile karakterize edilir. Robertsonian füzyonları ve spesifik translokasyonları içeren karmaşık bir karyotip sergilerler. Bu hücrelerde p53 geni mutasyona uğramıştır; bir alel ekson 4'te bir saçma mutasyon, diğeri ise ekson 5'te bir yanlış anlam mutasyonu taşır ve bu da normal p53 işlevinin kaybına neden olur. Bu genetik arka plan, klastojenik ve mutajenik etkilerin incelenmesinde bunların kullanışlılığını artırır.

Doku
Timüs
Hastalık
Fare timik lenfoma
Eş anlamlılar
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Lenfoblast benzeri
Hücre türü
T hücresi

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
L5178Y TK+/- Klon (3.7.2C) (Cytion katalog numarası 305485)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine %10 FBS ve %0,1 Pluronic F-68 ekleyin
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
0,1–2 × 10⁶ hücre/mL
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Hemen 25 ml kültür ortamına seyreltin (standart: 8 ml)
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, çözüldükten sonra yeterli canlılık sağlamak amacıyla %95 (h/h) FBS + %5 (h/h) DMSO + %0,1 Pluronic F-68 karışımını veya, hücrelerin toparlanmasını artırmak ve kriyo-kaynaklı stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1’i (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
DBA/2
Bağışçının yaşı
8 ay