Prejsť na obsah
Klon L5178Y TK+/- (3.7.2C)
Tkanivo
Thymus
Choroba
Lymfóm týmusu myši
Synonymá
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

Dokumenty

Klon L5178Y TK+/- (3.7.2C)

Cell line · Číslo výrobku 305485

Bunka L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C je model myšieho lymfómu, ktorý sa široko využíva na testovanie genotoxicity in vitro, najmä v teste s myším lymfómom a tymidínom...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C je model myšieho lymfómu, ktorý sa široko používa na testovanie genotoxicity in vitro, najmä v teste mutácie génu tymidínkinázy (TK) myšieho lymfómu (MLA). Tento klon bol odvodený z rodičovskej bunky L5178Y, vytvorenej z tymického lymfómu indukovaného metylcholantrénom u myší DBA-2. Subklon 3.7.2C bol špeciálne vyvinutý tak, aby bol heterozygotný v lokuse TK (TK+/−), čo umožňuje selekciu mutácií TK−/− prostredníctvom udalostí straty heterozygotnosti.

Bunky L5178Y TK+/− 3.7.2C sa vyznačujú rýchlym časom zdvojnásobenia populácie (približne 8 – 11 hodín) a stabilným modálnym počtom chromozómov 40. Vykazujú komplexný karyotyp vrátane Robertsonských fúzií a špecifických translokácií. Gén p53 je v týchto bunkách mutovaný, pričom jeden alel nesie nonsensovú mutáciu v exóne 4 a druhý missense mutáciu v exóne 5, čo má za následok stratu normálnej funkcie p53. Toto genetické pozadie zvyšuje ich využiteľnosť pri štúdiu klastogénnych a mutagénnych účinkov.

Tkanivo
Thymus
Choroba
Lymfóm týmusu myši
Synonymá
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
T bunky

04Identifikátory

Citácia
L5178Y TK+/- klon (3.7.2C) (číslo katalógu Cytion 305485)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium 10 % FBS a 0,1 % Pluronic F-68
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Hustota výsevu
0,1–2 × 10⁶ buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Okamžité zriedenie do 25 ml kultivačného média (štandard: 8 ml)
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame zmes 95 % (v/v) FBS + 5 % (v/v) DMSO + 0,1 % Pluronic F-68 na zabezpečenie dostatočnej životaschopnosti po rozmrazení, alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie kryoindukovaného stresu.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
DBA/2
Vek darcu
8 mesiacov