Clone L5178Y TK+/- (3.7.2C)

La linea cellulare L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C è un modello di linfoma murino ampiamente utilizzato per i test di genotossicità in vitro, in particolare nel test di mutazione del gene della timidina chinasi (TK) del linfoma murino (MLA). Questo clone è stato derivato dalla linea cellulare parentale L5178Y, stabilita da un linfoma timico indotto dal metilcolantrene in topi DBA-2. Il sottoclone 3.7.2C è stato sviluppato specificamente per essere eterozigote nel locus TK (TK+/−), consentendo la selezione di mutanti TK−/− attraverso eventi di perdita di eterozigosi.

Le cellule L5178Y TK+/− 3.7.2C sono caratterizzate da un rapido tempo di raddoppio della popolazione (circa 8-11 ore) e da un numero cromosomico modale stabile di 40. Presentano un cariotipo complesso che include fusioni robertsoniane e traslocazioni specifiche. Il gene p53 è mutato in queste cellule, con un allele che porta una mutazione nonsense nell'esone 4 e l'altro una mutazione missenso nell'esone 5, con conseguente perdita della normale funzione del p53. Questo background genetico ne aumenta l'utilità per lo studio degli effetti clastogenici e mutageni.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia