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Tissu
Poumon
Maladie
Carcinome à petites cellules
Site métastatique
Moelle osseuse
Synonymes
H2195, H-2195

Documents

NCI-H2195

Cell line · Référence du produit 305259

€550.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire NCI-H2195 est dérivée d'un carcinome pulmonaire à petites cellules (CPPC) humain. Plus précisément, cette lignée cellulaire a été établie à partir de la métastase de la moelle osseuse d'un patient adulte atteint d'un carcinome pulmonaire à petites cellules. Les cellules NCI-H2195 se caractérisent par leur morphologie épithéliale et leur capacité à se développer de manière adhérente en culture. Elles présentent des caractéristiques typiques du SCLC, notamment la présence de marqueurs neuroendocriniens et de mutations génétiques communément associées à cette forme agressive de cancer du poumon.

Les cellules NCI-H2195 sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer pour étudier les mécanismes moléculaires et cellulaires du carcinome pulmonaire à petites cellules. Il s'agit notamment d'étudier les voies impliquées dans la croissance tumorale, les métastases et la réponse au traitement. Les chercheurs utilisent cette lignée cellulaire pour étudier les effets des agents chimiothérapeutiques, des thérapies ciblées et des nouvelles stratégies de traitement sur le CPPC. La lignée cellulaire NCI-H2195 est particulièrement utile pour étudier les altérations génétiques et épigénétiques à l'origine du SCLC, telles que les mutations de TP53, RB1 et MYC, qui sont fréquemment observées dans ce type de cancer.

En outre, la lignée cellulaire NCI-H2195 sert de modèle pour les études précliniques visant à identifier des biomarqueurs pour la détection précoce, le pronostic et la réponse thérapeutique dans le carcinome pulmonaire à petites cellules. En fournissant un système in vitro fiable, cette lignée cellulaire contribue au développement de traitements plus efficaces et à une meilleure compréhension de la maladie, ce qui permet en fin de compte de faire progresser les approches de médecine personnalisée pour les patients atteints de cancer du poumon à petites cellules.

Tissu
Poumon
Maladie
Carcinome à petites cellules
Site métastatique
Moelle osseuse
Synonymes
  • H2195
  • H-2195

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
NCI-H2195 (numéro de catalogue Cytion 305259)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Expression et sensibilité

Profil mutationnel
Mutation : TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 1.6 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS, ITS+, Hydrocortison 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutamine
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
67 ans
Origine ethnique
Caucasien