Prejsť na obsah
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
H2195, H-2195

Dokumenty

NCI-H2195

Cell line · Číslo výrobku 305259

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia NCI-H2195 je odvodená od ľudského malobunkového karcinómu pľúc (SCLC). Konkrétne bola táto bunková línia vytvorená z metastáz kostnej drene dospelého pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Bunky NCI-H2195 sa vyznačujú epitelovou morfológiou a schopnosťou adherentného rastu v kultúre. Vykazujú typické znaky SCLC vrátane prítomnosti neuroendokrinných markerov a genetických mutácií, ktoré sa bežne spájajú s touto agresívnou formou rakoviny pľúc.

Bunky NCI-H2195 sa vo veľkej miere používajú vo výskume rakoviny na štúdium molekulárnych a bunkových mechanizmov malobunkového karcinómu pľúc. Patrí sem aj skúmanie ciest, ktoré sa podieľajú na raste nádoru, metastázovaní a odpovedi na liečbu. Výskumníci využívajú túto bunkovú líniu na skúmanie účinkov chemoterapeutických látok, cielených terapií a nových liečebných stratégií na SCLC. Bunková línia NCI-H2195 je obzvlášť cenná na štúdium genetických a epigenetických zmien, ktoré sú príčinou SCLC, ako sú mutácie TP53, RB1 a MYC, ktoré sa často vyskytujú pri tomto type rakoviny.

Bunková línia NCI-H2195 okrem toho slúži ako model pre predklinické štúdie zamerané na identifikáciu biomarkerov na včasnú detekciu, prognózu a terapeutickú odpoveď pri malobunkovom karcinóme pľúc. Tým, že táto bunková línia poskytuje spoľahlivý systém in vitro, prispieva k vývoju účinnejších liečebných postupov a lepšiemu pochopeniu ochorenia, čo v konečnom dôsledku napomáha rozvoju prístupov personalizovanej medicíny pre pacientov s SCLC.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
  • H2195
  • H-2195

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
NCI-H2195 (katalógové číslo Cytion 305259)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 1,6 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, ITS+, hydrokortizón 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutamín
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
67 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský