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Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma de células pequeñas
Lugar de metástasis
Médula ósea
Sinónimos
H2195, H-2195

Documentos

NCI-H2195

Cell line · Número de producto 305259

€550.00sin impuestos ni gastos de envío
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Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción

La línea celular NCI-H2195 procede de un carcinoma pulmonar de células pequeñas (CPCP) humano. En concreto, esta línea celular se estableció a partir de la metástasis de médula ósea de un paciente adulto con carcinoma pulmonar de células pequeñas. Las células NCI-H2195 se caracterizan por su morfología epitelial y su capacidad de crecimiento adherente en cultivo. Muestran rasgos típicos de SCLC, incluyendo la presencia de marcadores neuroendocrinos y mutaciones genéticas comúnmente asociadas con esta forma agresiva de cáncer de pulmón.

Las células NCI-H2195 se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer para estudiar los mecanismos moleculares y celulares del carcinoma microcítico de pulmón. Esto incluye investigaciones sobre las vías implicadas en el crecimiento tumoral, la metástasis y la respuesta al tratamiento. Los investigadores utilizan esta línea celular para explorar los efectos de agentes quimioterapéuticos, terapias dirigidas y nuevas estrategias de tratamiento del CPCP. La línea celular NCI-H2195 es particularmente valiosa para estudiar las alteraciones genéticas y epigenéticas que impulsan el CPCP, como las mutaciones en TP53, RB1 y MYC, que se observan con frecuencia en este tipo de cáncer.

Además, la línea celular NCI-H2195 sirve de modelo para estudios preclínicos destinados a identificar biomarcadores para la detección precoz, el pronóstico y la respuesta terapéutica en el carcinoma pulmonar microcítico. Al proporcionar un sistema in vitro fiable, esta línea celular contribuye al desarrollo de tratamientos más eficaces y a una mejor comprensión de la enfermedad, ayudando en última instancia al avance de enfoques de medicina personalizada para pacientes con CPCP.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma de células pequeñas
Lugar de metástasis
Médula ósea
Sinónimos
  • H2195
  • H-2195

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
NCI-H2195 (número de catálogo 305259 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Expresión y susceptibilidad

Perfil mutacional
Mutación: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucosa, w: 1,6 mM L-Glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, ITS+, Hidrocortisona 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutamina
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
2 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
67 años
Origen étnico
Caucásico