İçeriğe atla
Doku
Akciğer
Hastalık
Küçük hücreli karsinom
Metastaz yeri
Kemik iliği
Eş anlamlılar
H2195, H-2195

NCI-H2195

Cell line · Ürün numarası 305259

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H2195 hücre hattı, insan akciğer küçük hücreli karsinomundan (SCLC) türetilmiştir. Spesifik olarak, bu hücre hattı akciğer küçük hücreli karsinomu olan yetişkin bir hastanın kemik iliği metastazından oluşturulmuştur. NCI-H2195 hücreleri epitelyal morfolojileri ve kültürde yapışık olarak büyüme yetenekleri ile karakterize edilir. Nöroendokrin belirteçlerin varlığı ve akciğer kanserinin bu agresif formuyla yaygın olarak ilişkilendirilen genetik mutasyonlar da dahil olmak üzere SCLC'nin tipik özelliklerini sergilerler.

NCI-H2195 hücreleri, küçük hücreli akciğer karsinomunun moleküler ve hücresel mekanizmalarını incelemek için kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu, tümör büyümesi, metastaz ve tedaviye yanıtta rol oynayan yolaklara ilişkin araştırmaları içerir. Araştırmacılar bu hücre hattını kemoterapötik ajanların, hedefe yönelik tedavilerin ve yeni tedavi stratejilerinin SCLC üzerindeki etkilerini araştırmak için kullanmaktadır. NCI-H2195 hücre hattı, bu kanser türünde sıklıkla gözlenen TP53, RB1 ve MYC'deki mutasyonlar gibi SCLC'yi yönlendiren genetik ve epigenetik değişiklikleri incelemek için özellikle değerlidir.

Buna ek olarak, NCI-H2195 hücre hattı, küçük hücreli akciğer karsinomunda erken teşhis, prognoz ve terapötik yanıt için biyobelirteçleri tanımlamayı amaçlayan klinik öncesi çalışmalar için bir model görevi görmektedir. Bu hücre hattı, güvenilir bir in vitro sistem sağlayarak, daha etkili tedavilerin geliştirilmesine ve hastalığın daha iyi anlaşılmasına katkıda bulunmakta ve sonuçta SCLC hastaları için kişiselleştirilmiş tıp yaklaşımlarının ilerlemesine yardımcı olmaktadır.

Doku
Akciğer
Hastalık
Küçük hücreli karsinom
Metastaz yeri
Kemik iliği
Eş anlamlılar
  • H2195
  • H-2195

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H2195 (Cytion katalog numarası 305259)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 1.6 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, ITS+, Hydrocortison 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutamin ile destekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
67 yıl
Etnik köken
Kafkas