Siirry sisältöön
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Luuydin
Synonyymit
H2195, H-2195

Asiakirjat

NCI-H2195

Cell line · Tuotenumero 305259

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H2195-solulinja on peräisin ihmisen keuhkojen pienisoluisesta karsinoomasta (SCLC). Erityisesti tämä solulinja on luotu keuhkojen pienisoluista karsinoomaa sairastavan aikuispotilaan luuydinmetastaasista. NCI-H2195-soluille on ominaista niiden epiteelimorfologia ja kyky kasvaa adheesiomaisesti viljelyssä. Niillä on SCLC:lle tyypillisiä piirteitä, mukaan lukien neuroendokriiniset merkkiaineet ja geneettiset mutaatiot, jotka liittyvät yleisesti tähän aggressiiviseen keuhkosyöpämuotoon.

NCI-H2195-soluja käytetään laajasti syöpätutkimuksessa pienisoluisen keuhkosyövän molekyyli- ja solumekanismien tutkimiseen. Tähän sisältyy kasvaimen kasvuun, etäpesäkkeiden muodostumiseen ja hoitovasteeseen liittyvien reittien tutkiminen. Tutkijat käyttävät tätä solulinjaa tutkiessaan kemoterapeuttisten aineiden, kohdennettujen hoitojen ja uusien hoitostrategioiden vaikutuksia SCLC:hen. NCI-H2195-solulinja on erityisen arvokas tutkittaessa SCLC:n taustalla olevia geneettisiä ja epigeneettisiä muutoksia, kuten TP53-, RB1- ja MYC-mutaatioita, joita havaitaan usein tämäntyyppisissä syövissä.

Lisäksi NCI-H2195-solulinja toimii mallina prekliinisissä tutkimuksissa, joilla pyritään tunnistamaan biomarkkereita pienisoluisen keuhkosyövän varhaista havaitsemista, ennustetta ja hoitovastetta varten. Koska solulinja tarjoaa luotettavan in vitro -järjestelmän, se edistää tehokkaampien hoitojen kehittämistä ja taudin parempaa ymmärtämistä, mikä viime kädessä auttaa kehittämään yksilöllistä lääketiedettä pienikokoisen pienikokoisen keuhkosyöpäsolun potilaille.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Luuydin
Synonyymit
  • H2195
  • H-2195

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H2195 (Cytionin luettelonumero 305259)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: Val157Phe (c.469G>T)

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 1,6 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, ITS+:lla, hydrokortisonilla 10 nM, β-estradiolia 10 nM, L-glutamiinia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
67 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen